ｐＨ、电导率对尿沉渣流式细胞仪检测红细胞的影响
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[关键词] pH; 电导率; 尿红细胞
UF100结合流式细胞术与电阻抗法定量测定尿液中的有形成分,检测结果的精确度明显优于镜检法,临床上应用越来越广泛[1]。UF100不仅能对尿中红细胞进行计数,而且能分析红细胞的性质,有助于鉴别肾小球源性与非肾小球源性血尿。但许多因素影响尿液红细胞的数量与性质,为此我们配制了 “模拟血尿标本”, 在体外初步评价了pH、电导率及潴留时间对UF100检测红细胞的影响,现报告如下。
1 材料与方法
11 健康人尿标本
大学生4名,男女各2名,年龄22～23岁,中午餐后留取中段随机尿标本。
12 方 法
各取以上4名学生50 ml中段尿,分别将尿液准确加到10支试管中,每管5 ml。取其中1管作为测定对照,取其中5管用10 mmol/L HCl和10 mmol/L NaOH 分别调节尿pH至40,50,60,70,[]80;再取另外4支试管分别加入NaCl 0 mg,25 mg,50 mg,100 mg;混匀。在每支试管中加入自身毛细血管全血05 μl,混匀,37℃水浴,于加入全血后的0 h,05 h,2 h,4 h分别用UF100检测模拟血尿标本。
2 结 果
21 pH值变化对红细胞的影响
pH越低,红细胞越易被破坏;中性条件下破坏性降低;偏碱性尿液随模拟血尿标本水浴时间的延长,红细胞的数目、体积分布有明显变化。如表1、图1所示。表1 不同pH模拟血尿标本随水浴时间红细胞数量变化
22 电导率变化对红细胞的影响
低电导率条件下红细胞易被破坏,即使在较高电导率条件下,随模拟血尿标本水浴时间的延长,红细胞的数目、体积分布也会发生明显变化。如图2、表2所示。表2 不同电导率模拟血尿标本随水浴时间红细胞的数量变化
3 讨 论
正常人尿pH值参考范围为45～80,据此本实验用NaOH和HCl将标本pH 值调为40,50,60,70,80几个梯度。pH值偏低时,红细胞刚加入到尿液中大部分被溶解破坏;pH值偏碱时,红细胞的数量在两小时内变化不大,两小时后溶解现象明显,表明中性及碱性条件下红细胞破坏性降低,时间是关键的影响因素;在pH70时溶血率最低,这与文献报道一致[2]。从图1可以看出偏碱性条件下红细胞体积随着水浴时间的延长变化明显,甚至出现混合性血尿的特征性双峰。
一般情况下,尿液的渗透压与尿液的电导率有着良好的相关性,UF100 尿沉渣分析仪用电导率来反映尿液的渗透压[3]。健康大学生尿标本电导率在81～397 mS/cm [4],据此,本实验使用NaCl来调节标本电导率变化,使模拟血尿标本电导率大致在此范围内。低或高电导率条件下,红细胞在尿中保存时间较短,红细胞破坏明显,随着贮存时间的延长,仪器判断血尿的性质由正常细胞性(非肾小球性)血尿变为小细胞性(肾小球性)血尿。
模拟血尿标本中的新鲜红细胞来源于外周血,模拟血尿为模拟非肾性血尿,形态应规则一致,但由于pH、电导率及贮存时间延长等因素可使血尿中红细胞破坏,影响红细胞数量的测定,并在一定条件下也导致红细胞的性质发生改变,从而影响UF100的检测。尿成分极为复杂,许多因素影响尿中红细胞的检测,通过UF100检测4名研究对象的模拟血尿标本,虽然在同一pH值或电导率所测结果有差别,但随着pH、电导率的变化红细胞质与量的变化规律是一致的。所以,临床上在血尿检测特别是血尿性质的判断过程中,要注意尿pH、渗透压以及红细胞在尿中存留时间等因素的影响,并结合干化学、显微镜镜检仪、体检、用药等综合分析。
[参考文献]
[1] 毕重秀,马 波.尿显微镜检、干化学法、UF100 分析仪检测的临床意义[J].长春中医学院学报,2005,21(3):30.
[2] 梁恒龙.血尿标本对尿液分析仪结果的影响[J].临床医学,1998，18(5): 46.
[3] 林静华,焦晓阳,郑宇琼,等. UF100尿沉渣分析仪检测红细胞的影响因素研究[J].国际医药卫生导报,2004,10(2/3):63-64.
[4] 胡嘉波,顾可梁,许燕萍,等.UF100 型尿沉渣分析仪分析老年人尿沉渣变化[J].临床检验杂志,2001,19(4):218-219.
[5] 陈巧林，顾可梁，许燕萍，等.UF100尿沉渣流式细胞仪检测前后段尿尿沉渣差异的探讨[J].江苏大学学报：医学版，2002，12(3)：293-294.
(江苏大学医学技术学院， 江苏 镇江 212001)
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