以核苷酸为原料保健食品中核苷酸的含量测定(2)
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参见附件。
2.2.2 取消化液1.0ml,加水2.0ml,定磷试剂3.0ml,摇匀,于45℃水浴中放置20分钟,于660nm波长处测定吸收度(A660)。空白对照同样操作。
2.3 供试品中无机磷含量测定
另取供试品适量,用水稀释到50ml,取1.0ml,加水2.0ml,定磷试剂3.0ml,摇匀,于45℃水浴中放置20分钟,于660nm波长处测定吸收度(A660)。
2.4 结果计算
首先制作标准磷曲线,以5.2项中消化和5.3项中未消化的供试品溶液测得的A660 从标准曲线上查出总磷和无机磷的量,按式计算供试品中核苷酸的含量:
3 结果
3.1 线性和范围
3.1.1测定方法:取标准磷溶液(5μg/mL)0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5, 3.0mL,用水补足到
3.0mL,含磷量分别为0,2.5,5.0,7.5,10,12.5,15.0μg,加定磷试剂3.0mL后摇匀,于45℃水浴中放置20分钟,于660nm波长处测定吸光度(A660),0点为空白,以含磷量(μg) 为横坐标,以吸光度值(A660)为纵坐标绘制标准曲线。
3.1.2 标准曲线绘制:
标准曲线
3.1.3 单项结论:标准曲线为Y=0.04998X+0.00382,相关系数r=0.9999。
3.2 精密度
3.2.1 重复性
3.2.1.1对照测定:精密吸取6组标准磷溶液(5μg/mL)各1.0mL用水补足到3.0mL,加定磷试剂3.0mL后摇匀,于45℃水浴中放置20分钟,于660nm波长处测定吸光度(A660)。结果见表2 ......
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