PCR法和液体培养法检测解脲支原体结果分析
摘要：目的：比较聚合酶链反应(PCR)法和液体培养法在解脲支原体检测中的诊断价值和治愈判定价值。
方法：用聚合酶链反应(PCR)法和液体培养法对164例患者的泌尿生殖道分泌物进行检测解脲支原体。
结果：PCR法检测UU阳性71例，阳性率为43.3%，液体培养法阳性例数62例，阳性率为37.8%，PCR法阳性患者液体培养法有8例阴性，液体培养法阳性患者PCR法有2例阴性。
结论：PCR法检测解脲支原体，敏感性高，特异性强，并且简便、快速，适合门诊初查病人，液体培养法虽然敏感性比PCR法低，但能区别病原菌是否存活，且对指导临床用药有着不可替代的作用。
关键词：PCR法液体培养法解脲支原体
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2012)11-0020-01
, 百拇医药
支原体是泌尿生殖系统的正常寄生菌，属于条件致病菌，解脲支原体(UU)是支原体的一种，是引起泌尿生殖道非淋球菌性炎症中常见的病原菌之一[1]，可导致男女不育不孕、流产、死胎、女性生殖道炎症等一系列疾病。在一般情况下，被感染者多数无明显临床症状，易被忽略，临床上的漏诊率和误诊率也相对较高。常用检测UU的方法有液体培养法和PCR法，今对164例泌尿生殖道炎症患者同时采用PCR法和液体培养法进行检测，并对结果进行分析比较，报道如下。
1材料与方法
1.1一般资料。选择2012年6月我院门诊患者164例，其中男性26例，女性138例，年龄18-52岁。用无菌棉拭子插入女性宫颈1.0-1.5cm或男性尿道2-3cm，转动10秒并停留数秒钟后将棉拭子取出密闭送检。
1.2仪器与试剂。
1.2.1PCR法。仪器为达安基因股份有限公司生产的DA7600全自动荧光定量PCR分析仪，试剂盒为达安基因股份有限公司的配套产品。
, 百拇医药
1.2.2液体培养法。珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体培养、鉴定药敏试剂盒。
1.3方法。
1.3.1PCR法。标本试管中加入1ml无菌生理盐水，充分摇匀，吸取液体转至1.5ml离心管中离心5分钟，弃上清后沉淀加无菌生理盐水1ml混匀，离心5分钟后沉淀直接加50μlDNA提取液充分摇匀，在100℃金属浴中10分钟，离心5分钟后，取上清液5μl加入各反应管后放入PCR扩增仪进行PCR扩增。测定结果大于50copies/ml作为判断阳性标准。
1.3.2液体培养法。标本生物安全柜操作接种至UU液体培养基内，37℃培养，48h后观察培养液颜色有无改变。颜色无改变的为阴性，若培养基颜色由黄变为粉红色说明UU阳性。
2结果
PCR法检测UU阳性71例，阳性率为43.3%，液体培养法阳性例数65例，阳性率为39.6%。PCR法阳性患者液体培养法有8例阴性，液体培养法阳性患者PCR法有2例阴性。见表1。
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3结论
PCR检测技术具有高敏感性和高特异性，且不受细菌存活与否的限制，近几年来被广泛用于临床标本中UU检测，但该方法对实验条件和检查技术要求较高，在基层医院难于开展。液体培养法因具有较高的特异性和敏感性，一直被认为是检测UU最可靠的方法，但该方法操作费时，且受细菌存活与否的限制。通过本研究表明，PCR法检测的阳性率高于培养法，具有较高的敏感性，但其易受外界污染的影响而产生假阳性，取材没有取好也容易产生假阴性[2]。8例PCR法阳性而液体培养法阴性患者，可能是由于PCR法的高敏感性所至的假阳性，也可能是由于用药后患者体内支原体已经死亡使液体培养法不能培养出的原因。也可能是由于女性生殖道内杂菌较多，当标本中杂菌的量超过培养基中加入的抗生素的抑菌能力时，可导致培养基PH值改变，所以单纯依据生化反应的颜色变化来诊断支原体会造成假阳性的误判[3]。
综上所述，我们认为两种检测方法都有各自的优势。PCR法具有高敏感性和高特异性，能够快速得出结果，适合门诊初查病人；液体培养法虽然敏感性相对较低，但能区别病原菌是否存活，对指导临床用药有着不可替代的作用，且该方法操作简单，不需要特殊仪器，可在基层推广。
参考文献
[1]王荷英.性传播疾病的支原体感染[J].临床皮肤科杂志，1996，25：6-8
[2]叶顺章.聚合酶链反应在性病诊断的应用[J].中华皮肤科杂志，1996，29(3)：147-148
[3]吴晓红.两种方法检验解脲支原体的结果比较.江苏大学学报，2005，15(1)：71-72, http://www.100md.com(黄勇明)
方法：用聚合酶链反应(PCR)法和液体培养法对164例患者的泌尿生殖道分泌物进行检测解脲支原体。
结果：PCR法检测UU阳性71例，阳性率为43.3%，液体培养法阳性例数62例，阳性率为37.8%，PCR法阳性患者液体培养法有8例阴性，液体培养法阳性患者PCR法有2例阴性。
结论：PCR法检测解脲支原体，敏感性高，特异性强，并且简便、快速，适合门诊初查病人，液体培养法虽然敏感性比PCR法低，但能区别病原菌是否存活，且对指导临床用药有着不可替代的作用。
关键词：PCR法液体培养法解脲支原体
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2012)11-0020-01
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支原体是泌尿生殖系统的正常寄生菌，属于条件致病菌，解脲支原体(UU)是支原体的一种，是引起泌尿生殖道非淋球菌性炎症中常见的病原菌之一[1]，可导致男女不育不孕、流产、死胎、女性生殖道炎症等一系列疾病。在一般情况下，被感染者多数无明显临床症状，易被忽略，临床上的漏诊率和误诊率也相对较高。常用检测UU的方法有液体培养法和PCR法，今对164例泌尿生殖道炎症患者同时采用PCR法和液体培养法进行检测，并对结果进行分析比较，报道如下。
1材料与方法
1.1一般资料。选择2012年6月我院门诊患者164例，其中男性26例，女性138例，年龄18-52岁。用无菌棉拭子插入女性宫颈1.0-1.5cm或男性尿道2-3cm，转动10秒并停留数秒钟后将棉拭子取出密闭送检。
1.2仪器与试剂。
1.2.1PCR法。仪器为达安基因股份有限公司生产的DA7600全自动荧光定量PCR分析仪，试剂盒为达安基因股份有限公司的配套产品。
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1.2.2液体培养法。珠海浪峰生物技术有限公司生产的支原体培养、鉴定药敏试剂盒。
1.3方法。
1.3.1PCR法。标本试管中加入1ml无菌生理盐水，充分摇匀，吸取液体转至1.5ml离心管中离心5分钟，弃上清后沉淀加无菌生理盐水1ml混匀，离心5分钟后沉淀直接加50μlDNA提取液充分摇匀，在100℃金属浴中10分钟，离心5分钟后，取上清液5μl加入各反应管后放入PCR扩增仪进行PCR扩增。测定结果大于50copies/ml作为判断阳性标准。
1.3.2液体培养法。标本生物安全柜操作接种至UU液体培养基内，37℃培养，48h后观察培养液颜色有无改变。颜色无改变的为阴性，若培养基颜色由黄变为粉红色说明UU阳性。
2结果
PCR法检测UU阳性71例，阳性率为43.3%，液体培养法阳性例数65例，阳性率为39.6%。PCR法阳性患者液体培养法有8例阴性，液体培养法阳性患者PCR法有2例阴性。见表1。
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3结论
PCR检测技术具有高敏感性和高特异性，且不受细菌存活与否的限制，近几年来被广泛用于临床标本中UU检测，但该方法对实验条件和检查技术要求较高，在基层医院难于开展。液体培养法因具有较高的特异性和敏感性，一直被认为是检测UU最可靠的方法，但该方法操作费时，且受细菌存活与否的限制。通过本研究表明，PCR法检测的阳性率高于培养法，具有较高的敏感性，但其易受外界污染的影响而产生假阳性，取材没有取好也容易产生假阴性[2]。8例PCR法阳性而液体培养法阴性患者，可能是由于PCR法的高敏感性所至的假阳性，也可能是由于用药后患者体内支原体已经死亡使液体培养法不能培养出的原因。也可能是由于女性生殖道内杂菌较多，当标本中杂菌的量超过培养基中加入的抗生素的抑菌能力时，可导致培养基PH值改变，所以单纯依据生化反应的颜色变化来诊断支原体会造成假阳性的误判[3]。
综上所述，我们认为两种检测方法都有各自的优势。PCR法具有高敏感性和高特异性，能够快速得出结果，适合门诊初查病人；液体培养法虽然敏感性相对较低，但能区别病原菌是否存活，对指导临床用药有着不可替代的作用，且该方法操作简单，不需要特殊仪器，可在基层推广。
参考文献
[1]王荷英.性传播疾病的支原体感染[J].临床皮肤科杂志，1996，25：6-8
[2]叶顺章.聚合酶链反应在性病诊断的应用[J].中华皮肤科杂志，1996，29(3)：147-148
[3]吴晓红.两种方法检验解脲支原体的结果比较.江苏大学学报，2005，15(1)：71-72, http://www.100md.com(黄勇明)