新生SD大鼠心肌细胞培养方法的简化与改进(1)
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摘要：目的：改良SD大鼠乳鼠心肌细胞培养的条件和方法，以分离得到更高纯度和存活率的心肌细胞。方法：取出生1～3d内SD大鼠的心室组织，采用胰蛋白酶和I型胶原酶多次消化心肌，差速贴壁培养2h，加BrdU抑制成纤维细胞进行纯化培养，并在生物倒置显微镜下观察形态学变化，培养72h后，用免疫组化法检测纯度。培养5、7、15、20、30d时，用台盼蓝染色法检测存活率。结果：培养24h左右的细胞之间形成交联并有搏动，培养72h的心肌细胞的纯度为98.2%，培养15d内存活率大于95.0%。结论：本实验应用改良并简化的心肌细胞培养方法可得到纯度和存活率较高的原代乳鼠心肌细胞，适合进一步推广。
关键词：SD大鼠 乳鼠 心肌细胞 原代培养
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.07.023
【中图分类号】R4 【文献标识码】A 【文章编号】1671-8801(2013)07-0025-02
体外培养的大鼠心肌细胞保留了基本结构和功能，不受体内神经、体液等的影响，被广泛用于心血管生物学、细胞电生理、药理毒理学等研究，足够纯度和活力的心肌细胞是保证完成这些实验的基础[1]。文献报道的心肌细胞培养的方法很多，但都较为复杂，导致培养得到的心肌细胞纯度、活力各不相同[2]。本研究结合前人的经验，对新生SD大鼠的心肌细胞原代培养方法进行了简化，以期培养出纯度较高、活力较强的大鼠心肌细胞。
1 材料和方法
1.1 材料。
1.1.1 实验动物。出生1～3d的SD大鼠，雌雄不拘，由南昌大学实验动物科学部提供。
1.1.2 材料与试剂 ......
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