柯萨奇B3病毒VP1蛋白的诱导表达(1)
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代海丽(1986-),女,硕士研究生,讲师,主要从事病理学和病毒学相关研究。
摘要:目的:诱导表达柯萨奇B3病毒(CVB3)的VP1蛋白。
方法:针对CVB3基因的VP1区设计特异性引物,RT-PCR扩增VP1基因并将其克隆到pGEX-6p-1中,经IPTG诱导表达VP1蛋白。采用SDS-PAGE和Western blot检测VP1特异性蛋白的表达情况。
结果:SDS-PAG在相对分子量约54kD处可见目的条带,Western blot检测亦相对分子量约54kD处见到了清晰的蛋白条带。
结论:成功诱导表达了特异性较高的VP1蛋白。
关键词:柯萨奇B3病毒原核表达融合蛋白
【中图分类号】R4【文献标识码】A【文章编号】1671-8801(2013)11-0006-02
柯萨奇病毒B3(CVB3)属小RNA病毒科,肠道病毒属。流行病学调查显示,约50%的病毒性心肌炎与肠道病毒感染有关,特别是与CVB3的关系最为密切。同时,CVB3还会引起肝炎、胰腺炎和无菌性脑膜炎等疾病。近年来其发病呈上升趋势,但目前尚缺乏有效的防治措施。CVB3呈球形,直径约22~30nm,为单正链的RNA病毒,具有mRNA活性和感染性,全长为7397个核苷酸。依据其功能分,可分为5′端非编码区(5′-untranslated region,5′-UTR)、P1区、P2区、P3区、3′端非编码区(3′-UTR)和一个Poly(A)尾。P1区编码病毒的主要结构蛋白即衣壳蛋白,该区由VP1、VP2、VP3和VP4组成,其中VP1蛋白为病毒的主要中和抗原 ......
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