鸡贫血病毒VP3基因的克隆及在H22细胞中的凋亡诱导状况
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摘要 目的:观察CAV、vN基因在m2细胞中的凋亡诱导情况。方法:用PCR方法扩增了鸡贫血病毒标准株的VP3基因,并将其克隆于真核表达载体pcDNA3上,构建含CP3基因的重组体;在体外,利用Lipofect AMINE介导的基因转染法,将PcmVA—VP3 pcDNA3分别转入小鼠腹水型肝癌细胞系H22中,RT-PCR法检测VP3基因在细胞中的表达状况。同时利用流式细胞检测术验证VP3基因诱导死亡的方式。结果:酶切鉴定及测序分析表明,插入片段和预期相符,阳性重组体被命名为pcDNA-V丹;RT-PCR结果表明,转染后,VP3基因在细胞中得到了表达;同时DNA直方图也证实鸡贫血病毒的VP3基因确以凋亡的方式诱导细胞死亡。
关键词 鸡贫血病毒;基因克隆;细胞凋亡;VP3基因
中图分类号 R737.33
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