用显微切割－ＰＣＲ检测石蜡标本微小病灶ＤＮＡ异常
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摘要 目的：探讨在石蜡切片中行显微切割-PCR检测微小病灶基因突变和微卫星不稳定的方法及意义。方法：选取本室实验性大鼠肺鳞癌浸润癌伴有支气管粘膜上皮增生、鳞状化生和/或不典型增生的蜡块标本19例，分别切割各病变阶段组织并提取DNA用作PCR模板；SSCP检测P53基因第5—8外显子突变及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测微卫星点ADRB的不稳定现象。结果：7例支气管粘膜上皮增生，1例鳞状化生，12例不典型增生，19例浸润癌组织都分别成功地显微切割并提取DNA。除1例上皮增生及2例不典型增生组织PCR扩增失败外，其余切割组织P53外显子及微卫星点PCR扩增均获成功。19例浸润癌组织10例有P53基因突变，增生及鳞状化生组织未发现P53基因突变，10例不典型增生组织有3例P53基因突变，这3例标本中的浸润癌组织也都有相同外显子的突变。所有扩增成功微卫星点均未发现不稳定现象。结论：在石蜡标本中进行显微切割—PCR检测DNA异常可获得较满意结果。联合应用连续切片-HE染色—显微切割—PCR-银染技术使定点对位分析肿瘤发生发展各阶段微小病灶中基因异常得以实现，对于研究癌前病变、不典型增生组织中DNA分子变化有重要应用价值。
关键词 显微切片术；基因，P53；微卫星不稳定；石蜡切片；大鼠
中图分类号 R734.2
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