一种快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交技术的建立
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摘要 目的:建立快速稳定的人精子核双色荧光原位杂交的实验方法。方法:采用双色荧光原位杂交(fluores—cenceinsitu hybridization,FISH)方法取精于标本用EDTA/PBS液处理,再用二硫苏糖醇(DTT)使精子去凝集,甲醇/冰醋酸固定后制片,变性后与双色荧光直接标记(CEP X、Y)探针杂交。结果:在荧光显微镜下可见标本背景清晰,精子头部染成蓝色,边界清楚,头部有1个绿色荧光信号的精子为x精子,有1个红色荧光信号的精子为Y精于。精于头部有2个或2个以上信号的精子为染色体数目异常精于。结论:本方法具有快速、稳定、荧光信号强、易分辨等优点,可用于人性染色体非整倍体率的分析研究。
关键词 荧光原位杂交;人精子染色体;非整倍体
中图分类号 R321.1;Q32 文献标识码 B 文章编号 1671—8852(2005)02—0207—03
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