大鼠输卵管特殊糖蛋白基因片段的扩增、克隆与序列分析
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摘要 目的：大鼠输卵管特殊糖蛋白核苷酸序列的扩增、克隆及序列分析。方法：在Genebank中查找到已知的小鼠、金仓鼠、猪和人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列并运用PrimerPremier 5.o软件对这些输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。依据同源性较大的保守区基因序列设计一对引物，并提取大鼠输卵管总RNA作为模板进行RT—PCR，得到一条cDNA片段。将产物连接到T载体中，转化、扩增重组质粒。提取大肠杆菌中的重组质粒进行DNA测序。将DNA测序所得到的基因序列和已知的小鼠、金仓鼠、牛、羊及人的输卵管特殊糖蛋白的基因序列进行同源性分析。结果：利用RT—PCR的方法扩增出一条120 bp的目的基因片段，测序结果发现其和小鼠、金仓鼠、牛、羊和人的输卵管特殊糖蛋白的核苷酸序列的同源性分别为90%，90%，78%，87%。结论：本实验所获得的基因序列为目前尚未见报道的大鼠输卵管糖蛋白的基因序列的一部分。
关键词 大鼠；输卵管特殊糖蛋白；聚合酶链反应；克隆；DNA测序
中图分类号 R329.1 文献标识码 A 文章编号 1671—8852(2005)03—0329—04
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