Ｇｒａｎｕｌｙｓｉｎ真核表达载体的构建与鉴定
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摘要 目的：构建颗粒溶解素(granulysin)cDNA真核表达载体。方法：采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)技术从健康志愿者外肉血单个核细胞(PBMC)中扩增出颗粒溶解素蛋白cDNA，经限制性核酸内切酶消化后，插入真核表达载体pcDNA3.1(—)的相应酶切位点，将此重组质粒进行序列测定，并将重组质粒转染COS7细胞，进行基因表达鉴定。结果：重组质粒插入基因序列测定证实为颗粒溶解素cDNA，并能在COS7细胞稳定表达。结论：成功构建颗粒溶解素真核表达载体，为进一步研究其抗结核作用奠定了基础。
关键词 颗粒溶解素；cDNA；真核表达载体
中图分类号 R378.91 文献标识码 A 文章编号 1671—8852(2005)06—0804—04
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