PCNA的shRNA对子宫颈癌细胞的抑制研究
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摘要 目的:构建增殖细胞抗原(PCNA)的小发夹结构RNA(shRNA)的真核表达载体并在HeLa细胞表达,同时观察PCNA的shRNA对人HeLa细胞株体外增殖的影响及生物学特性的改变。方法:将PCNA的cDNA的shRNA引物插入真核表达载体pGenesil-1,构建真核表达质粒pGenesil-1-PCNAl-4,并通过酶切和测序等方法进行鉴定,将真核表达质粒pGenesil-1-PCNAl-4转染子宫颈癌细胞,运用Westernblot检测PCNA的蛋白表达,流式细胞仪分析细胞周期变化。结果:PCNA的shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,阻滞细胞G0/G1-S期,PCNA的蛋白表达同时受到抑制。结论:PCNA的shRNA能显著抑制人HeLa细胞的生长,其抑制作用可能通过阻断PCNA蛋白表达实现,实验结果为进一步研究PCNA的shRNA对子宫颈癌的基因治疗奠定了基础。
关键词 子宫颈癌;增殖细胞核抗原;小发夹结构RNA;子宫颈癌细胞;
中图分类号 R737.3 文献标识码 A 文章编号 1671—8852(2006)02—0170—04
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