刘静，蔡皓，段煜，裴科，周佳，张雅婷，莫子晴，钮敏洁

    (1.南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023；2.南京中医药大学国家教育部中药炮制规范化及标准化工程研究中心，江苏 南京 210023；3.山西中医药大学制药与食品工程学院，山西 太原 030024)

    四逆散(Sinisan，SNS)由柴胡、白芍、枳实和炙甘草组成，源于张仲景《伤寒论》。研究表明，SNS能够显著改善抑郁模型大鼠的抑郁状态[1]。本研究将醋柴胡(柴胡的炮炙品)和醋白芍(白芍的炮炙品)与枳实和炙甘草配伍，形成醋炙品组方四逆散(Vinegar-processed Sinisan，VPSNS)。由课题组前期实验研究可知，VPSNS也同样具有抗抑郁作用。但SNS和VPSNS抗抑郁的机制目前尚未明确。

    脑源性神经营养因子(BDNF)在抑郁症中发挥着非常重要的作用。环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)与学习记忆分子神经机制的关系特别受到关注，其参与介导依赖Ca2+的BDNF表达。此外，在抑郁的发展过程中，细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号在抑郁相关的大脑区域被破坏。由此我们推测，BDNF-ERK-CREB信号系统可能参与了抑郁症的分子机制。

    基于此，课题组拟通过对损伤指标和抑郁指标的检测，探讨皮质酮(CORT)致PC12细胞模型作为体外抑郁模型的科学性并探讨SNS以及VPSNS减轻CORT导致的PC12细胞损伤的分子机制。

    1 材料

    1.1 动物与细胞系

    SPF级SD大鼠，雄性，体质量(180±20)g，由浙江省医学科学院提供，许可证号：SCXK(浙)2019-0002；高分化PC12细胞购于上海赛百慷公司。

    1.2 药物与试剂

    柴胡饮片(产地：甘肃，批号：20161101)，白芍饮片(产地：安徽，批号：20161001)，枳实饮片(产地：江西，批号：20160901)和炙甘草饮片(产地：内蒙古，批号：20160801)均购自安徽铜陵禾田中药饮片有限公司，经检测均符合2015版《中国药典》(一部)各饮片项下的质量规定。醋柴胡饮片和醋白芍饮片均采用上述对应批号的柴胡饮片和白芍饮片按照2015版《中国药典》(四部)炮制至规定程度。

    MTT(北京Solarbio公司，批号：M8180-250)；胎牛血清(美国Gibco公司，批号：10099141)；青霉素-链霉素溶液(美国Gibco公司，批号：BL505A)；PBS缓冲液(德国Hyclone公司，批号：lw-sh30256.01)；胰酶(美国Gibco公司 ......