郑丽婷，周鸿，刘奕明，2，林爱华

    (1.广州中医药大学第二附属医院，广东 广州 510120；2.广东省中医证候临床研究重点实验室，广东 广州 510120)

    糖尿病是一种以糖代谢紊乱为主的慢性综合性疾病，它的死亡率仅次于肿瘤和心脑血管疾病，位居第三[1]。降糖药可通过促进胰岛素分泌，促进外周组织摄取葡萄糖，抑制糖异生，增强胰岛素敏感性,抑制人体消化道对糖类的吸收等治疗和控制糖尿病及其并发症。近年来研究发现，餐后高血糖是糖尿病发病过程中最先出现的症状，能够诱发各种并发症，提高糖尿病患者的死亡率[2]。α-葡萄糖苷酶抑制剂能通过抑制小肠上皮细胞绒毛膜上的α-葡萄糖苷酶的活性，延缓对葡萄糖的吸收，控制餐后血糖的升高，有助于防治2型糖尿病及其并发症[3]。近年来从药用植物中筛选天然的α-葡萄糖苷酶抑制剂成为国内外学者关注的热点[4-6]。

    黄柏为芸香科植物黄皮树的干燥树皮。现代研究表明黄柏具有降血糖、抗氧化、抗炎、降压、免疫调节等多种药理活性。黄柏碱是黄柏的特征性成分和重要活性成分之一,在降血压、抗肾炎、抑制细胞免疫反应和中枢抑制等方面具有显著效果[7-8]。黄柏碱是否具有降糖相关作用而成为黄柏降血糖活性物质尚未见报道,故本实验通过建立α-葡萄糖苷酶体外筛选模型，初步探讨黄柏碱对α-葡萄糖苷酶活性的影响及其作用类型；采用同源模建的方法构建来源于酿酒酵母的α-葡萄糖苷酶的三维结构，并借助分子对接的方法尝试性地阐释黄柏碱抑制α-葡萄糖苷酶的机制，以期为后续探讨黄柏碱降糖作用提供基础。

    1 材料

    1.1 试剂

    盐酸黄柏碱对照品，纯度99.44%，批号：MUST-17112110，成都曼斯特生物科技有限公司；阿卡波糖，纯度95%，批号：S11190，上海源叶生物科技有限公司；α-葡萄糖苷酶(酿酒酵母)，批号：S10050，上海源叶生物科技有限公司；对硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)，批号：S10137，上海源叶生物科技有限公司；磷酸二氢钾，批号：S24278，上海源叶生物科技有限公司；氢氧化钠，分析纯，批号：20171101-1，广州化学试剂厂；无水碳酸钠，分析纯，批号：20000601-1，广州化学试剂厂。

    1.2 仪器

    Infinite M1000 PRO多功能酶标仪(上海帝肯贸易有限公司)；ZXDP-B2050电热恒温培养箱(上海智城分析仪器制造有限公司)；PL303千分之一天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；MS105DU十万分之一天平(梅特勒-托利多仪器有限公司)；MS3数显型旋涡混匀器(德国IKA公司)；SI4002多微孔板振荡器(广州市浩瀚有限公司) ......