清肠化湿方对溃疡性结肠炎小鼠炎症及肠道菌群的影响
吡啶,磺胺,丁酸,1材料与方法,2方法,2结果,1清肠化湿方对UC小鼠一般情况的影响,2清肠化湿方对UC小鼠结肠长度的影响,3清肠化湿方对UC小鼠脾脏质量的影响,4清肠化湿方对UC小鼠结肠病理的影响,5清肠化湿
刘丽,康安,刘春样,田磊,刘志辉,沈洪(1.南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)
溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)属于炎症性肠病(Inflammatory bowel disease,IBD),是一种主要累及大肠黏膜、黏膜下层的慢性炎症性肠道疾病,表现有体质量减轻、腹泻、直肠出血和腹痛[1]。UC患者生活质量差,病情常反复发作,但是临床上西医用药及治疗手段种类有限、疗效欠佳,且预后很难判断。沈洪教授借鉴金代名医刘完素治疗“久痢”理法原则,将经方芍药汤加减化裁而成清肠化湿方,在临床实践中治疗湿热蕴肠、气血不调为主的活动期UC患者,可以很好地改善UC患者临床症状,降低复发率[2]。前期药效学实验结果亦显示清肠化湿方具有良好的抗炎、降低血管通透性和镇痛功效[3]。葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱导的UC造模简单且与人类UC具有高度相似性,经常用于研究UC的发病机理[1]。本文拟通过清肠化湿方干预治疗DSS制备的小鼠急性期UC模型,进一步探讨清肠化湿方治疗UC的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 药品及主要试剂 清肠化湿方由黄芩10 g,黄连6 g,煨木香6 g,炒当归10 g,地榆10 g,炒白芍15 g,白芷10 g,甘草6 g等组成,购自南京中医药大学附属医院,经南京中医药大学附属医院刘志辉教授鉴定为正品。上述饮片加入10倍量的水,浸泡1 h后,加热煎煮1 h,滤过;药渣再加8倍量水,煎煮1 h,滤过;合并2次滤液,减压浓缩,制成生药浓度为3.776 g/mL的制剂。DSS(平均分子量:36 000~50 000)为MP Biomedicals公司产品,用无菌饮用水制成质量分数为3%的溶液用于实验。柳氮磺胺吡啶(Salicylazosulfapyridine,SASP)购自上海信谊天平药业有限公司,用0.5% CMC-Na溶液配制成质量浓度为20 mg/mL用于实验。IL-6和TNF-α ELISA试剂盒为Biolegend公司产品。BCA试剂盒为碧云天生物技术有限公司产品。EZNA Stool DNA Kit为Omega Bio-tek公司产品,TransStartFastPfuDNA Polymerase为北京全式金生物技术有限公司产品,AxyPrep DNA GelExtraction Kit为Axygen Biosciences公司产品 ......
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