基于血清靶向代谢组学研究蒲地蓝消炎口服液对脂多糖诱导的急性肺炎小鼠能量代谢的影响
琥珀酸,代谢物,柠檬酸,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法,1动物实验及样本收集,2溶液的配制,3样本前处理及衍生化反应,4GC-MS分析条件,5质谱参数优化,6数据统计,3结
田刚,李超,翟园园,冯丽,徐佳,包贝华,姚卫峰,张丽,丁安伟(1.济川药业集团有限公司,江苏 泰州 225411;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)
蒲地蓝消炎口服液(PDL)由蒲公英、板蓝根、苦地丁、黄芩组成,具有清热解毒、消肿利咽的功效,适用于疖肿、腮腺炎、咽炎、扁桃体炎[1]。临床上常用于治疗急性上呼吸道感染,效果良好[2-4]。近年来,有报道显示PDL对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺炎具有保护作用,可减轻大鼠急性肺炎模型中肺组织的炎症反应,对肺组织的病理损伤有修复作用[5]。研究发现,肺部感染性疾病诱发的炎症,与三羧酸(TCA)循环等能量代谢过程紧密相关[6-7]。代谢组学是对生物体内代谢物进行定量分析,并寻找代谢物与生理病理变化相对关系的研究方式[8]。靶向代谢组学通过对生物样品中目标的低丰度代谢产物进行定量,能够更准确地反映生物系统中代谢分子的浓度变化,是代谢组学当前研究的新热点[9-11]。PDL在临床广泛运用于呼吸系统疾病的防治,疗效显著[12],基础研究结果显示,PDL能够显著改善LPS诱导小鼠急性肺炎[2],但尚未有对能量代谢方面的研究。本研究以LPS诱导ICR小鼠急性肺炎模型为研究对象,以靶向代谢组学为技术手段[10],探讨PDL对LPS诱导的急性肺炎小鼠糖酵解和TCA循环等机体能量代谢的影响及其可能的作用机制,为后续开展PDL抗急性肺炎的作用机制研究与临床用药提供方向和依据。
1 材料
1.1 仪器
HYQ-3110微量振荡器涡旋混匀器,低速台式离心机TDL-80-2B(上海安亭科学仪器厂);HH-ZK1电热恒温水浴锅,Milli-Q超纯水系统(美国Millipore公司),New Classic MS型分析天平(d=0.01 mg)(瑞士Mettlere toledo公司),KH-500B型超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司),TSQ 8000型三重四级杆气相色谱质谱联用仪(美国Thermo Fisher公司),色谱柱TG-5MS(美国Thermo Fisher公司),Infinite 200 pro多功能酶标仪(瑞士Tecan公司)。
1.2 药品与试剂
蒲地蓝消炎口服液(批号:1510313,济川药业集团有限公司);拜阿司匹林(批号:BJ43097,拜耳医药保健有限公司);乙醚(上海马陆化工厂);甲醇(德国Merck公司);1,2-13C2-肉豆蔻酸、吡啶、N,O-双(三甲基硅基)三氟乙酰胺(BSTFA)、甲氧基胺盐酸盐(美国Sigma-Aldrich公司);正己烷(美国ROE Scientific公司);氯化钠(江苏太仓化工厂) ......
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