蒋家璐，孙溧，倪姐，徐坠成，宋蒙蒙，姚卫峰，程海波，康安，孙东东,3

    (1.南京中医药大学药学院，江苏 南京 210023；2.江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心，江苏 南京 210023；3.南京中医药大学中医学院·中西医结合学院，江苏 南京 210023)

    半枝莲为唇形科植物半枝莲ScutellariabarbataD.Don的干燥全草。其性味辛、苦、寒，归肺、肝、肾经，是一味常用的清热解毒药。半枝莲的主要活性成分为黄酮及二萜类化合物，具有抗肿瘤、抗炎、化学预防等多种药理作用，其中黄酮类成分如木犀草素、野黄芩素、汉黄芩素等具有确切的抗肿瘤作用及抗炎作用[1]。研究表明半枝莲中的黄酮类化合物中，苷类成分的含量显著高于其相应的苷元成分。而黄酮苷类成分在体内，可通过肠道菌群中的糖苷类水解酶对其进行水解，进而发挥其效应[2-3]。此外黄酮苷类成分的化学预防作用可能与其和体内药物代谢酶，尤其是CYP1A1酶的相互作用有关[4-5]。

    CYP1A1是主要的细胞色素P450酶之一，其因参与多环芳烃(PAHs)代谢活化而受到广泛的关注[6]。PAHs暴露会诱导CYP1A1表达，而该酶又会将PAHs氧化代谢为具有遗传毒性的活性代谢物。目前，CYP1A1水平已成为环境和职业暴露于多环芳烃的生物标志物[7-9]。而当前的研究多采用多酚类物质来调控CYP1A1的表达起到化学预防的作用[5,10-11]。

    基于半枝莲中富含黄酮类成分，且未见从肠道菌群角度研究其活性成分对CYP1A1酶抑制能力的影响，进而关联其潜在的化学预防作用。因此本实验首先通过液质联用的方法测定了半枝莲中的主要化学成分在肠道菌代谢前后的含量变化，并使用肠S9与CYP1A1特异性底物乙氧基试卤灵温孵，根据其产物试卤灵来判断半枝莲提取物及其活性成分对CYP1A1酶活性的影响。最后结合体外肠道菌群代谢的结果与酶活实验结果筛选出潜在的活性化合物并通过分子对接进一步验证化合物与CYP1A1之间的结合能力。本研究旨在为半枝莲能够防治或减缓CYP1A1介导的致癌物的代谢活化提供新的证据支持，为其在化学预防领域中的应用提供新思路。

    1 材料

    1.1 试剂

    野黄芩素(批号：P23N4R1)，野黄芩苷(批号：YY20110513)，汉黄芩素(批号：P11M9F61014)，木犀草素(批号：YY20110606)，橙皮素(批号：HM0320KB14)购自上海源叶生物科技有限公司。汉黄芩苷(批号：H-019-170106)购自成都瑞芬思生物科技有限公司 ......