杨宁，周婕，吴瑞，徐新荣

    (南京中医药大学附属医院，江苏 南京 210029)

    年龄相关性黄斑变性(Age-related macular degeneration, AMD)是全球老年人主要不可逆致盲眼病之一，其致盲人数约占全球法定盲的8.7%，全球约有3 000多万AMD患者，每年有50多万人因AMD而致盲[1]。在中国，随着人口的老龄化，AMD所造成的视功能损害人数正逐年增加。

    临床上，AMD分为干性和湿性两型，干性AMD至今尚无确切有效的治疗措施，湿性AMD的治疗因抗血管内皮生长因子(VEGF)药物的广泛应用，有效改善和稳定了AMD患者的视力。但抗VEGF药物价格昂贵，又需反复球内注射，这给AMD患者带来心理困扰。有研究报道，六君子汤治疗湿性AMD取得良好效果[2]，但是确切作用机制和靶点并不明确。

    网络药理学通过构建靶点-靶点、成分-靶点、成分-靶点-通路等网络来阐明药物的作用机制，非常适合于多成分、多靶点的中药复方作用机制的研究[3]。本研究采用网络药理学方法，探明六君子汤治疗AMD的活性成分、作用靶点和信号通路，并对主要信号通路作用进行验证，以揭示其作用分子机制，阐释其科学内涵，为临床推广应用提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 药物 六君子汤由人参9 g，白术12 g，茯苓12 g，炙甘草6 g，陈皮3 g，法半夏5 g组成。药物为颗粒剂，购于江阴天江药业有限公司。

    1.1.2 细胞 人视网膜色素上皮细胞ARPE-19，购自美国ATCC公司。

    1.1.3 动物 SPF级SD雌性大鼠30只，体质量230～250 g，由南通大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK(苏)2019-0001。

    1.1.4 主要试剂 t-BHP购于美国Sigma Chemical公司，MTT试剂盒购自南京建成生物工程研究所(批号：G020-1-2)，AKT/p-AKT(4691/4060)、ERK1/2/p-ERK1/2(9102/9101)、p38/p-p38(9212/9211)一抗购自美国Cell Signaling Technology公司，VEGF(sc-7269)、β-actin(sc-47778)一抗和IgG/HRP二抗(sc2030)购自美国Santa Cruz公司。

    1.1.5 主要仪器 倒置生物显微镜(德国Leica公司)，酶标仪(美国Synergy公司)，电泳系统(美国Bio-RAD公司) ......