附子生物碱类成分分析及其抗肿瘤机制初探
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陆超颖,丁梦磊,蔡淑慧,谢辉,张雯,狄留庆(1.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中药高效给药系统工程技术研究中心,江苏 南京 210023)
附子为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx.的子根加工品,性热、味辛,首载于《神农本草经》,具有“破癥坚积聚”之功效[1]。中医临床广泛运用含附子的复方治疗肺癌、胃癌、肝癌等恶性肿瘤,如四逆汤、麻附益阳汤、参附注射液及复方三生注射液[2-5]。现代研究表明,附子生物碱类成分具有显著抗肿瘤药效[6-8]。然而,附子水煎液生物碱含量研究尚不清晰,抗肿瘤机制亦不明确。
生物碱类成分既是附子中有效成分,也是其毒性成分。汤剂为中医临床最常用剂型,对附子水煎液中生物碱进行定量可以更好地为附子临床药效与毒性评价提供参考与依据。本实验采用UPLC-MS/MS方法测定附子中生物碱含量,明确附子发挥药效的物质基础,对进一步揭示其抗肿瘤机制至关重要。由于附子生物碱种类众多,目前其抗肿瘤机制尚不清晰。基于中药成分的复杂性及作用的整体性,附子生物碱可能是通过多成分、多靶点、多途径发挥抗肿瘤作用,这与网络药理学的系统观相吻合[9]。然而目前尚未有运用网络药理学方法研究附子抗肿瘤机制的报道。本研究拟运用网络药理学预测其抗肿瘤机制,为附子抗肿瘤物质基础及临床应用提供参考。
1 材料
1.1 试药
黑顺片(批号:200630、200418、190927,产地:四川绵阳)购自永刚中药饮片厂,经南京中医药大学中药鉴定教研室刘圣金副教授鉴定为毛茛科植物乌头AconitumcarmichaeliDebx.的子根加工品,本试验前期已按照2020年版《中国药典》的检测方法和要求对饮片进行检验,选出优质产地的饮片。其余试药见表1。
1.2 仪器
Thermo TSQ Quantis液质联用仪(美国Thermo Fisher公司);梅特勒-托利多X6百万分之一电子天平(梅特勒-托利多国际贸易有限公司);液体加热器(潮州市一壶百饮电器实业有限公司);Synergy UV系统超纯水仪(美国Millipore公司);CL21 R型高速离心机(美国Thermo Fisher公司)。
2 方法
2.1 UPLC-MS/MS方法分析附子水煎液中生物碱类成分
2.1.1 色谱及质谱条件 Thermo TSQ Quantis液质联用仪系统,色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相为0.1%甲酸水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~1 min,2%~20% B;1~5 min,50% B;5~10 min,50%~75% B;10~14 min,75%~100% B)流速0.3 mL·min-1,柱温30 ℃,进样量2 μL ......
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