周杨,谢彤,时晨,康安,邓海山,单进军

    (1.南京中医药大学中医儿科学研究所,江苏省儿童呼吸疾病(中医药)重点实验室,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)

    急性肺损伤(Acute lung injury,ALI)是各种肺内外致病因素如严重感染、创伤、中毒、弥散性血管内凝血等导致的急性弥漫性炎症性肺损伤,以肺血管通透性增高、肺泡腔渗出富含蛋白质的液体、肺水肿及透明膜的形成为主要病理特征,可迅速发展为急性呼吸窘迫综合征[1-3]。课题组前期对桔梗汤治疗ALI进行了研究,发现桔梗汤对ALI小鼠有一定的保护作用[4],但是其单味成分桔梗的作用机制尚不清楚。

    代谢组学是组学领域的一大重要分支,主要用来研究各种小分子代谢物如氨基酸、脂肪酸等的动态变化,采用高通量的色谱、质谱等技术,结合统计学方法进行数据分析,识别并定量生物样本的代谢物,从而反映复杂生命体的整体功能[5-7]。近年来,代谢组学越来越多地运用到中医药领域中,尤其是疾病机制的研究[8]。本实验采用GC-MS技术分析桔梗给药前后ALI小鼠血清代谢物及代谢通路的变化,研究桔梗预防ALI的潜在作用机制。

    1 材料

    1.1 动物

    24只雄性SPF级C57BL/6J小鼠,体质量18～22 g,购自河南斯克贝斯生物科技股份有限公司,生产许可证号:SCXK(豫)2020-0005,于南京中医药大学动物中心SPF级动物饲养房适应性饲养3 d,温度(22±2)℃,湿度(75±5)%,清洁饮水,昼夜控制各12 h。实验动物使用许可证号:SYXK(苏)2018-0049,所有动物实验设计和方案均获得南京中医药大学动物伦理委员会同意和批准(伦理批号:201909A036)。

    1.2 药物与试剂

    桔梗(批号:101206)购于安徽丰原铜陵中药饮片有限公司;脂多糖(LPS,批号:0000081277)，甲氧胺盐酸盐(批号:BCBN2932V,纯度:98%),吡啶(批号:STBD3537V,纯度:99.8%),N-O-双(三甲硅基)三氟乙酰胺(BSTFA,批号:BCBS4254V,纯度:98.5%)，1,2-13C肉豆蔻酸(批号:SH2326V,纯度:99%)均购于美国Sigma-Aldrich公司;正己烷(批号:4A6004,纯度:95%)购于美国ROE公司;甲醇(批号:I880707710,纯度:99.9%)购于德国Merck公司;实验用水为娃哈哈纯净水;地塞米松片(批号：2004150211 ......