马尾松针提取物调控Nrf2-ARE通路治疗雄激素性脱发的研究
毛囊,1材料,1实验动物,2药物与试剂,3仪器,2方法,1马尾松针提取物的制备,2AGA小鼠模型的建立,3实验动物分组及处理,4AGA小鼠模型毛发生长评价,5皮肤组织中ROS和MDA含量的检测,6q
朱红柳,魏跃钢,闵仲生,高以红,羊剑秋(1.南京中医药大学江阴附属医院,江苏 江阴 214400;2.南京中医药大学附属医院,江苏 南京 210029)
雄激素性脱发(Androgenetic alopecia,AGA)是一种发生于青春期和青春期后的毛发进行性减少性疾病,也是临床最常见的脱发性疾病。据调查,全球约有60%~70%的人受到该病的影响[1]。在我国,男性AGA患病率为21.3%,女性为6.0%[2]。近年来,随着生活节奏的加快、饮食习惯的改变等,AGA的发病率呈现逐渐增多且年轻化的趋势。该病对患者的心理健康和生活质量有重要影响,目前经美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗AGA的药物非那雄胺和米诺地尔的有效率分别为48%和35%[1],且二者存在不同程度的不良反应。
研究发现,氧化应激可诱导毛囊提前进入退行期,抑制毛发生长并呈剂量依赖性地促进人毛囊角质形成细胞凋亡,参与AGA的病理发生[3-4]。松针提取物是指从松叶中提取的以黄酮类化合物为主的天然物质,具有抗氧化、抗炎、抗菌等多种生物学活性[5-6]。Kamimura等[7]研究发现原花青素作为一种天然抗氧化剂,能够呈剂量依赖性地抑制TGF-β1和TGF-β2诱导的毛囊上皮细胞凋亡,促进毛发生长。据此推测,同样具有较强抗氧化活性的松针提取物可能也具有促毛发生长的作用,但目前尚未见相关报道。马尾松针是分布最广、资源最多的一种松针。本实验拟通过建立双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)诱导的AGA小鼠模型,观察马尾松针提取物促毛发生长的作用,探讨马尾松针提取物对抗氧化应激关键信号通路核因子E2相关因子2(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)通路中相关蛋白表达的影响,为寻找新的治疗AGA药物提供实验依据。
1 材料
1.1 实验动物
48只SPF级雄性C57BL/6小鼠,6~8周龄,18~22 g,由重庆医科大学实验动物中心提供,实验动物许可证号:SYXK(渝)2018-0003。所有小鼠饲养于南京中医药大学实验动物中心,饲养温度(23±2)℃,湿度35%~60%,光照12 h。实验过程符合实验动物伦理道德的相关规定,实验伦理经南京中医药大学江阴附属医院伦理委员会审查通过,审查批件号:2018001。
1.2 药物与试剂
马尾松针由江阴市中医院提供。DHT(纯度≥98%,批号:ID0310)购自北京索莱宝科技有限公司,将1.2 g DHT粉末溶于橄榄油定容至20 mL配置成60 mg·mL-1混悬液 ......
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