周婷婷,沈卫星,2,陈桐庆,冯慧,谭佳妮,2,徐长亮,2,余成涛,2,范旻旻,2,程海波,2

    (1.南京中医药大学第一临床医学院,江苏 南京 210023;2.江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心,江苏 南京 210023)

    结直肠癌是发病率最高的消化道恶性肿瘤,对社会造成巨大负担[1]。奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)是第3代铂类药物,临床常用于结直肠癌的治疗。患者常在用药24～48 h内出现急性神经毒性,长期剂量累积会引起慢性神经毒性。若OXA用药累积剂量超过1 165 mg·m-2,大约有50%的患者会出现较严重的神经毒性反应,如肢端感觉麻木、钝痛等,从而导致化疗中止,最终影响疗效[2～3]。OXA神经毒性的产生与药物剂量累积效应呈正相关,此类周围神经毒性被称为蓄积性周围神经毒性[4]。临床研究表明,接受含OXA化疗方案的恶性肿瘤患者中蓄积性周围神经毒性发生率高达60%～90%,不仅影响患者化疗耐受性、依从性及临床疗效,还严重影响患者精神心理健康和生存质量[5]。因此,如何有效防治含有OXA化疗方案造成的周围神经毒性,减轻周围神经系统损伤已成为临床迫切需要解决的问题。

    探索一种新的化疗增效药物,在保持或增加化疗效果的前提下,降低OXA使用剂量,或缩短化疗周期,对减轻OXA所致的蓄积性周围神经毒性具有重要意义。近年来,中医药已广泛应用于肿瘤临床治疗。现代药理研究表明,预知子包含有三萜类及皂苷类等成分,具有抗肿瘤的作用[6-7],但对预知子中的成分是否可增效OXA尚未有相关报道。本实验以结肠癌HCT116细胞为研究对象,探索预知子提取物增敏OXA的最佳组合浓度,在保证抗肿瘤药效的前提下,减少OXA的使用剂量,并初步探讨其作用机制,为OXA治疗结直肠癌的临床应用提供思路。

    1 材料

    1.1 细胞

    人结肠癌HCT116细胞由国家中医药管理局名医验方评价与转化重点研究室提供。

    1.2 试剂

    预知子(河北福君堂药业有限公司，批号:190505,产地:河北);OXA(美国MCE公司,货号:HY-17371);皂苷B(实验室自制,纯度>98%);α-常春藤皂苷(成都瑞芬思生物科技有限公司,货号:27013-91-8);噻唑蓝(德国Biofroxx公司,货号:298-93-1);Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司,货号:KGA107);Cleaved caspase-3抗体(美国Affinity公司,货号:AF7022);Caspase-3、Bcl-2、Bax、Cyt-c抗体(英国Abcam公司,货号:AB13847、AB196495、AB5714、AB133504);p-p38 MAPK、p38 MAPK、抗兔IgG、抗鼠IgG抗体(美国CST公司,货号:4511T、8690T、7074、7076);GAPDH抗体(美国Immuno way公司,货号:YM3029);RIPA裂解液(上海碧云天生物技术有限公司,货号:P0013D)；蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂(瑞士Roche公司,货号:11697498001、4906845001) ......