基于UPLC特征图谱及多成分同时定量的酒女贞子炮制工艺研究
红景天,1材料,1仪器,2药品与试剂,2方法与结果,1酒女贞子饮片炮制,2特征图谱的建立,3化学模式识别分析,4含量测定,3讨论
林伟雄,邓李红,李美洲,陈仕妍,钟文峰,黄贵发,程学仁(1.广东一方制药有限公司,广东 佛山 528244;2.广东省中药配方颗粒企业重点实验室,广东 佛山 528244;3.中国中药控股有限公司,广东 佛山 528303)
女贞子为木犀科植物女贞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果实,具有滋补肝肾,明目乌发的功效,用于眩晕耳鸣,腰膝酸软,须发早白等肝肾阴虚证[1]。2020年版《中国药典》收录了女贞子和酒女贞子2种饮片,女贞子经酒蒸或酒炖为酒女贞子后,“形如女贞子,表面黑褐色或灰黑色,常附有白色粉霜,微有酒香气”[1]。中医理论认为,女贞子生品性凉,以清肝明目、滋阴润燥为主,多用于肝热目眩、阴虚肠燥便秘等症;而酒能活血通络、祛风散寒,故炮制后的酒女贞子寒凉之性减弱,滋补肝肾作用增强,临床更多用于肝肾阴虚等证,现代临床亦可用于治疗慢性肝炎、高血脂等症[2-4]。
现代研究表明,女贞子主要包含环烯醚萜苷类、苯乙醇苷类、黄酮类、萜类、挥发油、脂肪酸等化学成分[5-6],其中最具活性和药用价值的属环烯醚萜苷类化合物,含量较高的有特女贞苷、女贞苷、女贞苷G13和橄榄苦苷等裂环环烯醚萜苷类,这类化合物具有抗氧化、增强免疫、抑制肿瘤、抗血脂等作用[7-8];另外苯乙醇类中的红景天苷和酪醇等具有抗菌、抗炎、抗肝损伤等多种生物活性[9-10]。女贞子经过酒蒸或酒炖等不同炮制方法以及在不同的炮制程度下,其活性成分会发生不同程度的分解与转化,与炮制品酒女贞子药性与药效的改变密切相关,进而影响其临床疗效。纪鑫等[11]测定了女贞子中非三萜类成分,与同批次女贞子相比,酒女贞子中5-羟甲基糠醛和红景天苷的含量大幅升高,而女贞子酒蒸后环烯醚萜苷类成分的含量普遍降低,因其分子结构中的环烯醚萜部分大多通过其裂环上的酯键与红景天苷或酪醇或羟基酪醇等苯乙醇类化合物相连,在高温高湿环境下易发生裂解[12-14]。在2020年版《中国药典》中仅规定了女贞子含量项下特女贞苷不得少于0.7%,酒女贞子中红景天苷含量不得少于0.2%的单指标含量限度要求,缺少女贞子药材及其炮制品酒女贞子的整体质量控制方法,因此有必要对酒蒸或酒炖不同炮制方法及不同炮制程度下的酒女贞子进行化学成分种类及含量变化的研究[1]。本研究建立女贞子炮制前后UPLC特征图谱,同时测定红景天苷、特女贞苷及女贞苷G13的含量,并运用聚类分析、主成分分析(PCA)与正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等多模式识别方法对UPLC特征图谱中多指标变量进行统计分析,可有效监控女贞子不同炮制方法及不同炮制程度下的主要共性和差异性化学成分,为其药效物质基础及质量控制研究奠定基础 ......
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