李秋红,胡勇,鞠爱霞,赵娇,郄青松,周育生

    (黑龙江中医药大学药学院,黑龙江 哈尔滨 150040)

    雷公藤多苷是从雷公藤TripterygiumwilfordiiHook.F.去皮根部提取的皂苷类有效成分,雷公藤甲素和雷公藤内酯酮等二萜类成分、雷公藤内酯甲和雷公藤红素等三萜类成分、雷公藤次碱和雷公藤晋碱等生物碱类成分是其主要有效和有毒成分[1-4],用于治疗慢性肾小球疾病、肾病综合征、类风湿性关节炎、红斑狼疮等难治或顽固性疾病,有“中草药激素”之称,但易产生肾毒性，临床使用受限[5-7]。中药配伍具有中医遣方用药的优势特色,既可增强疗效,又可减轻或消除毒性。甘草GlycyrrhizauralensisFisch.具有“和诸药,解百毒”之称,三萜皂苷类化合物甘草酸是甘草主要活性成分。研究表明,甘草酸可保护肾脏，拮抗药源性、缺血再灌注性、梗阻性等多种类型肾损伤,临床上用于病毒性肝炎、慢性肾病和免疫性皮肤病等的治疗[8-10]。实验研究证实,雷公藤配伍甘草治疗肾病，疗效优于单用雷公藤,具有增效减毒的作用[11-14],但产生这种效应的分子机制尚不明确。网络药理学是药物作用靶点预测的有效方法[15],能从组织、细胞、分子等层面对成分复杂的中药进行研究,是揭示药物、基因和疾病相互作用的系统和整体方法,为中药作用机制的研究提供思路。

    因此,本研究通过网络药理学方法预测甘草酸与雷公藤多苷的作用靶点,从中选出与肾脏转运体有关的靶基因,并在动物水平进行验证,以期为临床两药配伍使用提供实验依据。

    1 材料

    1.1 药品及主要试剂

    雷公藤多苷片(湖南千金协力药业有限公司,批号:20180603);甘草酸(上海源叶生物科技有限公司,批号:X12A9C58435,纯度>95%);尿素氮(BUN)检测试剂盒、肌酐(Scr)检测试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号:20181218、20181214);动物总RNA快速抽提试剂盒(上海生工生物工程股份有限公司,批号:EA12KA9784);FastKing cDNA第一链合成试剂盒(北京天根生化科技有限公司,批号:R6720);FastStart Universal SYBR Green Master(ROX)核酸染料(德国罗氏诊断有限公司,批号:04913914001);Western及IP裂解液(上海碧云天生物技术有限公司,货号:P0013);P-gp一抗、MRP2一抗(北京博奥森生物技术有限公司，批号:bs1468R、bs1092R);β-actin一抗、辣根酶标记抗鼠IgG、辣根酶标记山羊抗兔IgG(H+L)(北京中杉金桥生物技术有限公司 ......