杨葛俊,邹珏瑶,赵涵,陈琼,何勇,陆茵,2,陈文星,2

    (1.南京中医药大学药学院,江苏省中药药效与安全性评价重点实验室,江苏 南京 210023;2.南京中医药大学江苏省中医药防治肿瘤协同创新中心,江苏 南京 210023)

    癌症是现代社会严重威胁人类生命健康的主要疾病之一[1],中医药在治疗肿瘤方面具有悠久的历史。大多数中医学者认为“瘀血内阻”为恶性肿瘤发生的核心病机[2],据此辨证治疗恶性肿瘤也多从活血化瘀法论治。但因活血药以调控肿瘤微环境为主,对机体免疫系统影响有限,活血益气药优于单一活血药[3]。而恶性黑色素瘤患者多有素体虚弱的症状,故临床多以活血药与补益药配伍使用,以奏扶正祛瘀,标本兼治之效。丹参、人参分别作为活血化瘀及扶正益气的代表药物之一,但二者配伍能否起到协同抗黑色素瘤转移效果,值得我们进一步探讨。

    肿瘤微环境作为肿瘤的一大特征[4],是大多数恶性肿瘤分化进程的基础,在肿瘤发生发展过程中发挥着至关重要的作用。汤钊猷院士认为[5],治疗恶性肿瘤不能仅针对消灭肿瘤细胞,还要着眼于改造肿瘤所处的微环境,即重塑肿瘤微环境,使恶性肿瘤患者能够实现带瘤生存。因此,干预肿瘤微环境已成为当今肿瘤研究的一大热点。而肿瘤微环境最显著的特征之一即免疫抑制[6],免疫抑制的肿瘤微环境被认为是引发恶性肿瘤转移复发的根源之一[7]。其中骨髓源性抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)大量浸润,在肿瘤的发生发展过程中起到关键作用,其表达与恶性肿瘤患者预后成负相关,降低MDSCs表达有助于抑制癌症的发生发展[8-9]。中药丹参中主要脂溶性成分隐丹参酮,已明确可作为天然STAT3抑制剂来调控MDSCs[10];人参中人参皂苷Rg3[11]、人参多糖[12]等均能够调节肿瘤免疫微环境,达到抗肿瘤的作用,而目前尚未有关丹参-人参配伍调控MDSCs的研究文章。目前治疗素有“癌中之王”之称的黑色素瘤仍是一项极大的挑战,从分子药物到靶向治疗再到免疫治疗,针对黑色素瘤的治疗手段经历了一次次革新。靶向MDSCs治疗恶性肿瘤的研究，已成为当前的研究热点之一[13]。因此,本研究旨在通过分子生物学手段明确丹参-人参配伍能否有效抑制黑色素瘤转移,并揭示其机制是否为协同调节MDSCs表达来重塑肿瘤微环境。

    1 材料

    1.1 肿瘤细胞系

    小鼠黑色素瘤细胞-荧光素酶标记细胞株(B16F10-Luciferase)及小鼠黑色素瘤细胞绿色荧光稳定表达细胞株(B16F10-EGFP)均购于中国科学院细胞库 ......