蟾酥及其潜在代用品NJ2196抗LPS诱导小鼠神经炎症的等效性评价
脂质,低剂量,海马,1材料,1实验动物,2实验药物,3主要仪器,4主要试剂,2方法,1实验分组及给药,2检测方法,3统计学方法,3结果,1蟾酥和NJ2196对小鼠抑郁行为的影响,2蟾酥和NJ2
钱意,张亚文,吕翔,朱雨雨,李念光,段金廒,周婧,马宏跃(南京中医药大学药学院/江苏省中药资源产业化过程协同创新中心/江苏省方剂高技术研究重点实验室,江苏 南京 210023)
蟾酥是我国传统名贵中药,由蟾蜍科动物中华大蟾蜍BufobufogargarizansCantor或黑框蟾蜍BufomelanostictusSchneider等耳后腺及皮肤腺分泌物经加工干燥而成,具有清热解毒、消肿止痛和开窍醒神的功效,是多种中药大品种和传统中成药的关键原料。随着蟾蜍生态环境的破坏和商业捕杀的增加,野生中华大蟾蜍数量急剧减少乃至面临濒危困境。虽然人工养殖近年快速兴起,但仍未解决资源紧张问题。蟾酥商品价格高昂、供需矛盾巨大迫使代用品研发十分必要[1]。
蟾酥含有复杂的化学物质,已知包括多样的蛋白质、多肽类大分子和强心甾、吲哚生物碱类小分子。从化学组学的视角审视,其活性物质尚未完全揭示。实验室前期采用Denovo转录组测序技术结合蛋白组学方法,率先报道了蟾酥中蛋白和多肽类物质,并对部分基因序列进行克隆验证[2-3];采用细胞亲和筛选的方法,报道了蟾酥中一些独特序列多肽[4];确定了一系列蟾酥内酯和生物碱的药效标志物[5-6]。基于实验室前期的工作,马宏跃、段金廒等设计了“化学特征类似、药效近同、安全性更高”的蟾酥潜在代用品,优化形成NJ2196。
本文是蟾酥和NJ2196等效性评价系统工作的一部分。鉴于免疫-神经系统互作在炎症反应方面的重要作用,本文选用了脂多糖(LPS)诱导小鼠神经炎症抑郁模型进行等效性评价。此外,本文首次报道蟾酥药材的抗炎性抑郁活性。
1 材料
1.1 实验动物
SPF级ICR小鼠,雄性,体质量18~22 g,购自杭州医学院,实验动物许可证号:SCXK(浙)2019-0002,动物实验通过南京中医药大学伦理委员会审查,伦理号:202206A016。适应性饲养1周,饲养条件:温度22~26 ℃,昼夜节律,相对湿度40%~70%。
1.2 实验药物
蟾酥药材(产地:苏州),经马宏跃教授鉴定为蟾蜍科动物中华大蟾蜍BufobufogargarizansCantor的干燥分泌物,质量符合2020年版《中国药典》标准[7] ......
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