基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析前胡化学物质组及体内成分
胡素,香豆素,白花,1材料,1仪器,2试剂,3药材,2方法,1样品制备,2动物实验,3色谱条件,4质谱条件,5数据处理,3结果,1前胡体外成分鉴定,2前胡体内成分鉴定,4讨论
吉春亮,苏艳,张金戈,盛先杰,张健榕,单晨啸(1.句容市第四人民医院药剂科,江苏 镇江 212008;2.南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023)
前胡Peucedaniradix为伞形科植物白花前胡PeucedanumpraeruptorumDunn的干燥根。其性微寒,味苦、辛[1]。作为疏风清热,止咳祛痰的常用中药之一,近年来关于前胡化学成分分析的文献报道提示,前胡中的多种香豆素类化合物,可能是其解热祛痰,治疗感冒、咳嗽、支气管炎及疖肿等病症的物质基础[2-3]。前胡中的香豆素主要包括简单香豆素、角型吡喃香豆素和呋喃香豆素3种,通常可以通过测定香豆素类的含量来评价前胡的质量[4-5]。《中国药典》以白花前胡甲素及白花前胡乙素为其含量测定项下的指标性成分,规定前胡含白花前胡甲素(C21H22O7)不得少于0.90%,含白花前胡乙素(C24H26O7)不得少于0.24%[6]。另外有研究表明,白花前胡甲素及白花前胡乙素具有较好的抗炎作用,可通过抑制NF-κB、STAT3等信号通路控制炎症反应的发生[7-9]。
虽然目前关于前胡的化学活性成分研究较多,但未见全面分析其进入体内的原型成分及代谢物,特别是被吸收进入肺组织中的活性成分及代谢物的研究报道较少[10-11]。因此,有必要对前胡的化学成分及体内活性成分进行全面研究,进而阐明其药效物质基础。本研究拟采用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析表征前胡的化学成分,通过与混合对照品的质谱信息及文献对比化合物的质荷比、相对保留时间、二级质谱图及裂解方式,推测其中的化学成分。再根据动物实验给药后入血及入肺的原型及代谢情况,推测前胡的体内代谢过程,为阐明其药效物质基础甚至治病机制等研究提供依据[12-13]。
1 材料
1.1 仪器
AB SCIEX Triple TOFTM5600质谱仪(美国AB Sciex公司),LC-20A快速液相仪(日本Shimadzu公司),Milli-Q超纯水机(美国Millipore公司),MS3.Digital旋涡振荡器(IKA公司),Speed Vac离心浓缩仪(美国Thermo Scientific公司),Neofuhe23R台式高速冷冻离心机(上海力申科学仪器有限公司),ER-2000A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂),SK8200H数控超声波清洗仪(上海科导超声仪器有限公司),BS214D型万分之一电子天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。
1.2 试剂 ......
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