刘涛, 嵇晶,2, 王令充,程建明,2

    (1. 南京中医药大学药学院,江苏 南京 210023;2. 江苏省经典名方工程中心,江苏 南京 210023)

    疲劳是连续性的体力劳动或脑力劳动后机体内所发生的一系列复杂生理生化变化过程。疲劳发生的机制复杂,目前尚不明确。现有观点认为,疲劳的发生是神经系统、免疫系统以及内分泌系统等多因素共同参与的结果[1]。疲劳发展过程中,免疫系统异常激活,体内多种炎症因子水平显著升高,并作用于中枢神经系统,诱导机体产生疲劳样症状[2]。研究表明炎症是导致慢性疲劳综合症的一个因素,慢性疲劳综合症是一种炎性有关的疲劳疾病。炎性疲劳(Inflammatory fatigue),也称炎症相关性疲劳,是指在有明显炎症相关的疾病中很常见,并伴有包括运动不耐受和运动后不适,疼痛的各种表现以及情感障碍等一系列其他症状的疲劳[3]。

    黄精作为我国传统中药之一,是有名的药食同源物品[4],具有历史悠久的药用记载和确切的临床疗效。其味甘、性平,归脾、肺、肾经,具补气养阴、健脾、润肺、养胃补肾之功效,用于脾胃气虚,体倦乏力,胃阴不足,口干食少,肺虚燥咳,劳嗽咳血,精血不足,腰膝酸软,须发早白,内热消渴。长期以来,黄精被中医视为“长生不老药和延年益寿药”,临床和民间常将其用于疲劳及衰老相关疾病预治中[5-6]。多花黄精是药用黄精中的一个重要品种,因其分布范围广,种植量大,品质高而被研究领域与行业专家所重视,目前已被作为主要原料开发成各类型的大健康产品[7-8]。现代植物化学与药理学研究揭示多花黄精富含多糖、皂苷、甾体、黄酮等多种活性成分[9],具有抗疲劳、增强免疫力、降血糖、抗肿瘤、抗菌、抗氧化、抗炎等多种药理活性[10],但其发挥作用的物质基础与作用机理仍未彻底揭示。

    网络药理学融合了生物信息学和药理学的方法,可系统地阐释中药及其化合物与疾病的相互关系,探究成分发挥作用的生物学机制[11]。本研究对多花黄精的小分子成分进行LC-MS鉴定,并结合数据库进行其抗炎性疲劳的网络药理学研究,通过测定RAW264.7细胞活力、NO释放量及炎症因子IL-6和TNF-α分泌水平,研究多花黄精的抗炎作用。

    1 材料

    1.1 药物与试剂

    多花黄精药材(安徽亳州,批号:20220507)购于亳州市博耀保健食品有限公司,经南京中医药大学严辉教授鉴定为多花黄精药材饮片;甲醇、甲酸均为色谱纯,德国Merck公司产品;DMEM培养基(批号:WH0023X061)、PBS(批号:WH0022A161)、胎牛血清(批号:SA220415)购于武汉普诺赛生物科技有限公司;MTT试剂(批号:EZ7890C413)购于赛国生物科技有限责任公司;无水二甲基亚砜(DMSO)(批号:20211014)购于国药集团化学试剂有限公司;IL-6、TNF-α ELISA(批号:202307)试剂盒购于南京翼飞雪生物科技有限公司;NO检测试剂盒(批号:110922230302)购于碧云天生物技术公司;AB-8大孔树脂(批号:20221205)购于杭州市星如仪器设备公司 ......