陈浩,张天琦,马骁,付秋悦,张杉,严肃,陈刚

    (1.南京中医药大学附属医院/江苏省中医院整形外科,江苏 南京 210029;2.宜兴市中医院整形外科,江苏 宜兴 214200)

    皮瓣移植作为修复创面和皮肤缺损的重要手段[1],在整形外科、血管外科、显微外科及骨科等领域应用广泛,而其最常见的并发症——缺血再灌注损伤,常常会引起皮瓣坏死,给患者及其家庭造成一定经济和心理负担。在临床上,术后发生皮瓣缺血再灌注损伤的患者往往体衰无力,局部难以温养,而其局部紫暗、刺痛等特点,满足血瘀的表现,故将其病理特点概述为“气虚血瘀”。针对其特点,我们运用补托法代表方——托里消毒散对出现皮瓣缺血再灌注损伤的患者进行治疗,发现该方可有效防治皮瓣缺血再灌注损伤。托里消毒散出自《外科正宗》[2],由人参、川芎、白芍、黄芪、白术、茯苓、当归、金银花、白芷、甘草、桔梗、皂角刺组成。但目前针对托里消毒散治疗机制方面的研究报道较少。NF-κB作为防治皮瓣缺血再灌注损伤的经典通路,在皮瓣缺血再灌注损伤过程中发挥着重要作用。因此本研究拟在构建大鼠背部任意皮瓣缺血再灌注损伤模型的基础上,通过分析皮瓣的成活率、检测NF-κB通路的p-p65和p-IκBα蛋白指标,TNF-α、IL-1β与IL-6炎性因子的表达情况和皮瓣表皮Ki67及CD31表达,探讨托里消毒散对大鼠皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用及其机制,为托里消毒散治疗皮瓣缺血再灌注损伤的临床应用提供新的科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选取健康SD大鼠40只,雌雄各半,体质量(250±20)g,购自江苏华创信诺医药科技有限公司,实验动物许可证号:SCXK(苏)2020-0009。饲以条杆状动物饲料,自由饮水,环境保持20～25 ℃、恒湿(50±5)%,自然采光。动物实验规程经南京中医药大学实验动物伦理委员会批准(ACU210127)。

    1.2 实验药品和试剂

    NF-κB p65抗体(货号:AF1234)、p-NF-κB p65(Ser276)抗体(货号:AF5875)、IκBα抗体(货号:AF1282)、p-IκBα(Ser32)抗体(货号:AF1870)、Ki67抗体(货号:C2312S)、CD31抗体(货号:AG5142)购自于碧云天;大鼠血清 TNF-α(货号:MTA00B-1)、IL-6(货号:SM6000B) 和 IL-1β(货号:DY401)ELISA检测试剂盒购自R&D System。

    1.3 主要仪器及设备 ......