孕激素对兔血管平滑肌细胞ＡＴ〈ｓｕｂ〉ｌ〈／ｓｕｂ〉受体基因表达的作用差异及机制分析

http://www.100md.com 2005年11月1日 尚美生 乔中东 吕吉元 赵荣瑞

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     摘要：目的 通过观察孕激素对培养血管平滑肌细胞(VSMCs)AT_lRmRNA表达的影响，并寻求探索其潜在的分子机制，为临床干预提供实验依据。方法 分别用孕激素及其特异性受体拮抗剂对培养的血管平滑肌细胞行不同时间、不同浓度的处理，然后用胰蛋白酶—EDTA消化，离心收集，提取总RNA，用RT—PCR对AT，R mRNA进行半定量分析，利用Westem—blot对其相应的蛋白进行测定。结果 孕酮对VSMCsAT_lR的影响呈现明显的时间依赖性，12 h达到最大值为156%±18%，表现为上调；并呈现浓度依赖性，当孕酮浓度是10^-10M时对ATlRmRNA的上调影响达到最大为59.9%±4.2%；孕酮对AT_lRmRNA蛋白的上调以12h为最大，达到最大值为8.44%±1.08%；孕酮受体拮抗剂0.1 nM的米非司酮对VSMCsAT_lRmRNA无影响，但米非司酮抵消了孕酮对VSMCsAT_lR mRNA的上调作用，而孕酮引起的AT_lRmRNA的上调只能被三磷酸肌醇(IP₃)的抑制剂Wortmannin所抑制。结论 孕酮对VSMCsAT_lRmRNA表现为上调，其特征呈现时间和浓度依赖性，其最大上调作用发生于12 h，最大作用的浓度为0.1 nM，孕激素的作用机制可能是与其受体结合后激活了IP₃激酶的第二信号系统。

    关键词：动脉粥样硬化；平滑肌细胞；孕激素；AT_l受体

    中图分类号：R329.3 R285.5

    文献标识码：A

    文章编号：1672—1349(2005)11—0977—04

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