丹红注射液治疗大鼠急性脑梗死的实验研究
摘要：目的观察丹红注射液对大鼠局灶脑缺血模型的治疗作用。方法采用自体血栓大脑中动脉闭塞模型，观察假手术组、局灶脑缺血组(对照组)、局灶脑缺血丹红注射液治疗组(治疗组)神经功能评分、脑梗死范围、脑含水量、病理学改变等指标的变化。结果造模3d后治疗组脑含水量和神经系统评分明显优于对照组(P3×70mm，0.7～1.0×700)，分析天平(日本岛津)。
1.4实验方法
1 4.1分组及给药24只实验动物随机分为3组，即假手术组、局灶脯缺血组(对照组)、局灶脑缺血丹红注射液组(治疗组)，每组8只。治疗组按照2mL/kg给予丹红浓缩注射液，对照组于等渗盐水，术后6h从尾静脉注入，每日1次，连续5d。
1.4 .2局灶脑缺血模型制备，采用自体血栓大脑中动脉闭塞模型(MCAO)：以3.5%水合氯醛腹腔麻醉，颈部正中直切口依次分离出左颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)、电凝ECA分支，甲状腺上动脉、忱动脉、结扎颈内动脉为重要分支翼腭动脉，离断ECA(似手术组到此为止)，从ECA插入24G静脉留置针，拔出针芯，取血1mL，5000r/rain离心1min，按5：1吸取血浆及红细胞，加入2u凝血酶，制成直径约0.35mm的血栓，切成(1.5～2.0)mm，用麻醉导管吸取(6～8)个栓子，从静脉留置针快速注入到ICA内，苏醒后按Bederson评分标准进行神经功能缺失评分，有体征者人选。
, 百拇医药
1.5检测指标
1.5.1神经功能缺损评 分3组分别于术后1d，3d，5d进行神经功能缺损评分，按Bedersm标准评分，0级(0分)：无神经功能障碍；1级(1分)：提大鼠尾，见瘫痪侧前肢回收屈曲不能正常伸向地而；2级(2分)：除1级体征外，向瘫痪侧推时感阻力较对侧明显降低；3级(3分)：除以上体征外，大鼠爬行时向瘫痪侧施转。
1.5.2腑梗死体积测定 造模后第5天伸经功能缺损评分后断头取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑T，将剩余部分冠状切片，置于2%TTC溶液中37℃孵育(15～20)min再放人4%多聚甲醛溶液中固定，梗死区为苍白色，正常为均匀橘红色，用TI2000图像分析系统测定脑梗死体积。
1.5.3脑含水量测定(干湿重法)造模后1d，3d，5d 3组进行冲经功能评分后将动物处死迅速取脑，将缺血侧腑组织置于电子天平称湿重，然后放入电热恒温箱内100℃烘烤24h取出，至电子天平称干重，计算公式：脑含水量(%)=(湿重-干重)/湿重×100%。
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1.5.4组织病理学观察 各组动物以水合氯醛麻醉，4%多聚甲醛灌流固定，断头取脑，相同固定液中固定，乙醇梯度脱水，二甲笨透明，浸蜡包埋、切片，厚约5μm，HE染色，封固，光镜下观察病变区及附近脑组织变化。
1.6统计学处理，结果采用t检验，用SPSS10.0统计软件，计量资料以均数±标准差(x±s)表示。
2 结果
2.1 丹红注射液对人鼠神经功能的影响第1大，治疗组神经功能缺损评分低于对照组，但无统计学意义(P>0.05)，第3天和第5天治疗组评分明显低于对照组(P
2.2 丹红注射液对脑梗死体积的影响 造模后第5天，治疗组大鼠脑梗死体积(74.20±9.00)mL，明显小于对照组(90.20±16.16)mL，两组比较有统计学意义(P0.05)。而第3天、第5天大鼠的脑含水量均低于对照组(P
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3 讨论
急性脑血管病是现今病化率最高的三大疾病之一，其中尤以缺血性脑血管病为最多见(约占70%)。除发病率、致死率、复发率高外，由此引起的瘫痪、失语及痴呆不仅使病人的生存质量低下，更是社会和家庭的沉重负担。降低该病的病死率和致残率的关键是积极进行超早期抢救治疗，主要途径是：①溶解血栓，抗血小板凝聚，恢复脑血流灌注；②神经细胞和血管内皮细胞保护治疗，阻止由缺血及缺血后再灌注引起的脑组织一系列病理和生化反应，降低致残率。
丹红注射液为中药丹参、红花按科学配方提取的复方制剂，其主要有效成分包括丹参酮、丹参酚酸、红花黄色素等。从20世纪90年代以来，对于中药丹参和红花在治疗缺血性脑血管病方面的作用和机制已有较多的研究，对这两种药物的主要有效成分及作用机制有以下几点认识：①丹参酚酸有较强的抗血小板凝聚的作用，可以显著降低血浆的血栓素B2(TXB2)水平；②丹参酚酸和丹参酮有抗血栓形成、改善微循环、抗氧化损伤等作用；③红花能有效也抑制血小板黏附、聚集，激活和释放血栓素A2(TXA2)，激活血管内皮细胞释放前列环素(PGI2)，纠正外周循环中TXA2/PGI2平衡失调，对脑缺血再灌注损伤具有积极的防治作用；④红花黄色素可抑制血小板激活因子(PAF)介导的血小板活化作用。但对其复方制剂目前研究较少。
本组研究采用自体血栓闭塞大脑中动脉构建出大鼠急性脑缺血模型，然后对治疗组大鼠给予丹红注射液治疗，结果发现：造模3 d后治疗组在脑含水量和神经系统评分明显优于对照组(P, 百拇医药(邓 芬 胡长林)
1.4实验方法
1 4.1分组及给药24只实验动物随机分为3组，即假手术组、局灶脯缺血组(对照组)、局灶脑缺血丹红注射液组(治疗组)，每组8只。治疗组按照2mL/kg给予丹红浓缩注射液，对照组于等渗盐水，术后6h从尾静脉注入，每日1次，连续5d。
1.4 .2局灶脑缺血模型制备，采用自体血栓大脑中动脉闭塞模型(MCAO)：以3.5%水合氯醛腹腔麻醉，颈部正中直切口依次分离出左颈总动脉(CCA)、颈外动脉(ECA)、颈内动脉(ICA)、电凝ECA分支，甲状腺上动脉、忱动脉、结扎颈内动脉为重要分支翼腭动脉，离断ECA(似手术组到此为止)，从ECA插入24G静脉留置针，拔出针芯，取血1mL，5000r/rain离心1min，按5：1吸取血浆及红细胞，加入2u凝血酶，制成直径约0.35mm的血栓，切成(1.5～2.0)mm，用麻醉导管吸取(6～8)个栓子，从静脉留置针快速注入到ICA内，苏醒后按Bederson评分标准进行神经功能缺失评分，有体征者人选。
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1.5检测指标
1.5.1神经功能缺损评 分3组分别于术后1d，3d，5d进行神经功能缺损评分，按Bedersm标准评分，0级(0分)：无神经功能障碍；1级(1分)：提大鼠尾，见瘫痪侧前肢回收屈曲不能正常伸向地而；2级(2分)：除1级体征外，向瘫痪侧推时感阻力较对侧明显降低；3级(3分)：除以上体征外，大鼠爬行时向瘫痪侧施转。
1.5.2腑梗死体积测定 造模后第5天伸经功能缺损评分后断头取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑T，将剩余部分冠状切片，置于2%TTC溶液中37℃孵育(15～20)min再放人4%多聚甲醛溶液中固定，梗死区为苍白色，正常为均匀橘红色，用TI2000图像分析系统测定脑梗死体积。
1.5.3脑含水量测定(干湿重法)造模后1d，3d，5d 3组进行冲经功能评分后将动物处死迅速取脑，将缺血侧腑组织置于电子天平称湿重，然后放入电热恒温箱内100℃烘烤24h取出，至电子天平称干重，计算公式：脑含水量(%)=(湿重-干重)/湿重×100%。
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1.5.4组织病理学观察 各组动物以水合氯醛麻醉，4%多聚甲醛灌流固定，断头取脑，相同固定液中固定，乙醇梯度脱水，二甲笨透明，浸蜡包埋、切片，厚约5μm，HE染色，封固，光镜下观察病变区及附近脑组织变化。
1.6统计学处理，结果采用t检验，用SPSS10.0统计软件，计量资料以均数±标准差(x±s)表示。
2 结果
2.1 丹红注射液对人鼠神经功能的影响第1大，治疗组神经功能缺损评分低于对照组，但无统计学意义(P>0.05)，第3天和第5天治疗组评分明显低于对照组(P
2.2 丹红注射液对脑梗死体积的影响 造模后第5天，治疗组大鼠脑梗死体积(74.20±9.00)mL，明显小于对照组(90.20±16.16)mL，两组比较有统计学意义(P0.05)。而第3天、第5天大鼠的脑含水量均低于对照组(P
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3 讨论
急性脑血管病是现今病化率最高的三大疾病之一，其中尤以缺血性脑血管病为最多见(约占70%)。除发病率、致死率、复发率高外，由此引起的瘫痪、失语及痴呆不仅使病人的生存质量低下，更是社会和家庭的沉重负担。降低该病的病死率和致残率的关键是积极进行超早期抢救治疗，主要途径是：①溶解血栓，抗血小板凝聚，恢复脑血流灌注；②神经细胞和血管内皮细胞保护治疗，阻止由缺血及缺血后再灌注引起的脑组织一系列病理和生化反应，降低致残率。
丹红注射液为中药丹参、红花按科学配方提取的复方制剂，其主要有效成分包括丹参酮、丹参酚酸、红花黄色素等。从20世纪90年代以来，对于中药丹参和红花在治疗缺血性脑血管病方面的作用和机制已有较多的研究，对这两种药物的主要有效成分及作用机制有以下几点认识：①丹参酚酸有较强的抗血小板凝聚的作用，可以显著降低血浆的血栓素B2(TXB2)水平；②丹参酚酸和丹参酮有抗血栓形成、改善微循环、抗氧化损伤等作用；③红花能有效也抑制血小板黏附、聚集，激活和释放血栓素A2(TXA2)，激活血管内皮细胞释放前列环素(PGI2)，纠正外周循环中TXA2/PGI2平衡失调，对脑缺血再灌注损伤具有积极的防治作用；④红花黄色素可抑制血小板激活因子(PAF)介导的血小板活化作用。但对其复方制剂目前研究较少。
本组研究采用自体血栓闭塞大脑中动脉构建出大鼠急性脑缺血模型，然后对治疗组大鼠给予丹红注射液治疗，结果发现：造模3 d后治疗组在脑含水量和神经系统评分明显优于对照组(P, 百拇医药(邓 芬 胡长林)