神经干细胞移植在脊髓损伤修复中的应用进展(2)
的作用。卢坷恩等在探讨NSCs移植脊髓损伤细胞保护作用机制的研究中，对各组大鼠进行了爬坡实验及MEP的检测，表明NSCs移植后组织水肿减轻，Na+、Ca2+显著降低，K+，Mg2+显著升高。这提示，NSCs对SCI的保护作用饥制可能与其减少神经细胞离子失衡，改善细胞内微循环有关。Mitsui等探讨永生化NSCs移植对SCI大鼠排泄功能的影响，发现NSCs组的单位排尿量明显增加、排尿压力明显减小、残余尿量明显减少，NSCs能促进低级排尿中枢功能的恢复、Lu等认为NSCs在神经系统损伤唇有替代缺失组织的潜能，实验发现NSCs在体外能持续分泌几种特殊的神经营养因子，促进轴突的生长，经RT-PCR检测移植的干细胞能在活体内表达神经营养因子，经皋因修饰的NSCs能表达促进宿主轴突牛长的NT-3。证明NSCs能分泌牛长因子促进宿主神经的生长，基因传递加速这种作用。
2.2神经干细胞综合移植治疗脊髓损伤 Cai等在探讨lentivirus介导基因工程的人胚NSCs的作用时，发现含有转基因人胚NSCs的培养液能诱导鼠背根神经节轴突的迅速增长，所有基因工程的人神经f细胞能表达高水平的GFP和NT-3，此项研究表明lentivirus介导基因工程的人胚NSCs不但能促进轴突的再生，同时能成功的表达多种基因。Kegami等发现单纯的NSCs移植虽然可以促成SCI的修复，但在某些情况下，移值的NSCs容易黏附在某些活体空腔壁上，较难移行和融合到宿主组织，软骨素黏蛋白(CSPG)作为神经胶质疤痕的构成物能住脊髓损伤后强烈表达，是活体内NSCs移植的抑制剂，因此运用软骨素酶亲和一生物素复合物(C-ABC)联合NSCs移植治疗SCI，并比较基因介导组与单独移植组的区别，发现C-ABC能稀释CSPG对移植细胞迁移的抑制作用，促进移植细胞与宿主的融合，促进_5H性蛋白43纤维数目的增多和生长，这表明CABC、介导的移植组通过减少胶质瘢痕抑制作用以促进NSCs在体内的辽移和宿主融合性。Castellanos等认为轴突虽然在合适的酶作用下有能力再生，但如果缺乏合适纤维生长靶位就会限制脊髓环路的修复。因此，为解决这一问题，首先将TRK-C基因和NT-3因子修饰的伸经前体细胞移植钊完整的大鼠脊髓内，观察他们的存活与分化，发现两种处理因素联用能促进NSCs的存活，减少向星彤胶质细胞的分化，并能填补脊髓空洞、促进B-微管蛋白纤维在移植细胞周围的增生。郭加松等在NT-3修饰NSCs与NSCs联合移植治疗脊髓全横断损伤的研究中，发现SCS经NT-3基因修饰后，过量分泌的NT-3不仅能防止脊髓损伤后神经元的萎缩，促进脊髓损伤结构与功能修复的效果更好，促进受损伤的上行和下行轴突再生。当二者联合移植时有相互促进作用。李巍等在脊髓损伤大鼠的研究中发现采用BDNF修饰NSCs移植后，BDNF基因修饰的NSCs能在脊髓损伤移植处存活，强烈表达BDNF。李成仁等在肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)修饰NSCs移植对损伤大鼠脊髓功能的研究中，发现NOV修饰的NSCs和分化出来的子代细胞能恒定表达NOV蛋白，而分化出来的不成熟星形胶质细胞可引导神经元的迁移和轴突的生长。周健洪等对于骨形成蛋白4(BMP4)对SCI后大鼠功能和NSCs的影响研究表明：BMP4可减轻神经损伤症状和对脊髓损伤后神经干细胞有促进增殖作用。Teng等研究表明植入了NSCs专门的聚合体支架能使大鼠的共济运动及后肢承重功能得到明显的改善。程映华等用壳聚糖及NSCs复合物桥接成年SD大鼠完全性脊髓损伤，可使损伤脊髓恢复解剖上的连续性，植入的复合材料与宿主脊髓达到良好的整合，再生的轴突穿过宿主移植物界面。复合材料在移植后脊髓断端发挥桥梁作用，使再生的神经轴突能跨越损伤区。李晓滨等在督脉电针与NSCs联合应用促进全横断脊髓损伤研究，这一机制可能为督脉电针促进受损伤的脊髓组织细胞代谢过程，引起细胞膜的腺苷酸环化酶活性增高，使ATP生成CAMP增加，从而激活神经元和神经胶质细胞内蛋白激酶A的级联反应，启动神经生长因子和细胞营养因子等蛋白质的合成和分泌过程，从而促进脊髓内神经干细胞的存活和分化，以及促进受损神经元的存活及其轴突再生。
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3 结语
NSCs移植在实验研究中已取得了较显著的进展，但毕竟动物的解剖、病理生理与人存在差异较大，因此NSCs移植人人体后，仍存在着较多的问题。①干细胞的培养和纯化问题，来源涉及伦理问题，尤其是异体胚胎干细胞的采取，如何保证培养的细胞在人体内一定分化为NSCs而不是其他类型的组织细胞；②移植的时机，虽然已有动物实验研究证明在脊髓损伤后1周～2周移植治疗效果较好，但由于动物与人存在差异，临床移植的最佳时机，仍没有确切的答案；③病例的遴选是否有特定的范围，存在着有效和无效的病例，这种情况产生的原因是什么?④尚有不为人知的副反应，如躯体不适、免疫排异反应、能否发生突变产生肿瘤；⑤在移植入人体后，采取何种指标显示其存活、分化。这一切都需要进一步的临床研究，相信这些问题随着研究的深入，都会得到不同程度的解决。
作者简介：赵宁(1976-)，女，现为湖南中医药大学2004级硕士研究生(邮编：518052)；杨万章，工作于深圳市第六人民医院。
(本文编辑 王雅洁)
[ 上 页 ], 百拇医药(赵 宁 杨万章)
2.2神经干细胞综合移植治疗脊髓损伤 Cai等在探讨lentivirus介导基因工程的人胚NSCs的作用时，发现含有转基因人胚NSCs的培养液能诱导鼠背根神经节轴突的迅速增长，所有基因工程的人神经f细胞能表达高水平的GFP和NT-3，此项研究表明lentivirus介导基因工程的人胚NSCs不但能促进轴突的再生，同时能成功的表达多种基因。Kegami等发现单纯的NSCs移植虽然可以促成SCI的修复，但在某些情况下，移值的NSCs容易黏附在某些活体空腔壁上，较难移行和融合到宿主组织，软骨素黏蛋白(CSPG)作为神经胶质疤痕的构成物能住脊髓损伤后强烈表达，是活体内NSCs移植的抑制剂，因此运用软骨素酶亲和一生物素复合物(C-ABC)联合NSCs移植治疗SCI，并比较基因介导组与单独移植组的区别，发现C-ABC能稀释CSPG对移植细胞迁移的抑制作用，促进移植细胞与宿主的融合，促进_5H性蛋白43纤维数目的增多和生长，这表明CABC、介导的移植组通过减少胶质瘢痕抑制作用以促进NSCs在体内的辽移和宿主融合性。Castellanos等认为轴突虽然在合适的酶作用下有能力再生，但如果缺乏合适纤维生长靶位就会限制脊髓环路的修复。因此，为解决这一问题，首先将TRK-C基因和NT-3因子修饰的伸经前体细胞移植钊完整的大鼠脊髓内，观察他们的存活与分化，发现两种处理因素联用能促进NSCs的存活，减少向星彤胶质细胞的分化，并能填补脊髓空洞、促进B-微管蛋白纤维在移植细胞周围的增生。郭加松等在NT-3修饰NSCs与NSCs联合移植治疗脊髓全横断损伤的研究中，发现SCS经NT-3基因修饰后，过量分泌的NT-3不仅能防止脊髓损伤后神经元的萎缩，促进脊髓损伤结构与功能修复的效果更好，促进受损伤的上行和下行轴突再生。当二者联合移植时有相互促进作用。李巍等在脊髓损伤大鼠的研究中发现采用BDNF修饰NSCs移植后，BDNF基因修饰的NSCs能在脊髓损伤移植处存活，强烈表达BDNF。李成仁等在肾母细胞瘤过度表达基因(NOV)修饰NSCs移植对损伤大鼠脊髓功能的研究中，发现NOV修饰的NSCs和分化出来的子代细胞能恒定表达NOV蛋白，而分化出来的不成熟星形胶质细胞可引导神经元的迁移和轴突的生长。周健洪等对于骨形成蛋白4(BMP4)对SCI后大鼠功能和NSCs的影响研究表明：BMP4可减轻神经损伤症状和对脊髓损伤后神经干细胞有促进增殖作用。Teng等研究表明植入了NSCs专门的聚合体支架能使大鼠的共济运动及后肢承重功能得到明显的改善。程映华等用壳聚糖及NSCs复合物桥接成年SD大鼠完全性脊髓损伤，可使损伤脊髓恢复解剖上的连续性，植入的复合材料与宿主脊髓达到良好的整合，再生的轴突穿过宿主移植物界面。复合材料在移植后脊髓断端发挥桥梁作用，使再生的神经轴突能跨越损伤区。李晓滨等在督脉电针与NSCs联合应用促进全横断脊髓损伤研究，这一机制可能为督脉电针促进受损伤的脊髓组织细胞代谢过程，引起细胞膜的腺苷酸环化酶活性增高，使ATP生成CAMP增加，从而激活神经元和神经胶质细胞内蛋白激酶A的级联反应，启动神经生长因子和细胞营养因子等蛋白质的合成和分泌过程，从而促进脊髓内神经干细胞的存活和分化，以及促进受损神经元的存活及其轴突再生。
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3 结语
NSCs移植在实验研究中已取得了较显著的进展，但毕竟动物的解剖、病理生理与人存在差异较大，因此NSCs移植人人体后，仍存在着较多的问题。①干细胞的培养和纯化问题，来源涉及伦理问题，尤其是异体胚胎干细胞的采取，如何保证培养的细胞在人体内一定分化为NSCs而不是其他类型的组织细胞；②移植的时机，虽然已有动物实验研究证明在脊髓损伤后1周～2周移植治疗效果较好，但由于动物与人存在差异，临床移植的最佳时机，仍没有确切的答案；③病例的遴选是否有特定的范围，存在着有效和无效的病例，这种情况产生的原因是什么?④尚有不为人知的副反应，如躯体不适、免疫排异反应、能否发生突变产生肿瘤；⑤在移植入人体后，采取何种指标显示其存活、分化。这一切都需要进一步的临床研究，相信这些问题随着研究的深入，都会得到不同程度的解决。
作者简介：赵宁(1976-)，女，现为湖南中医药大学2004级硕士研究生(邮编：518052)；杨万章，工作于深圳市第六人民医院。
(本文编辑 王雅洁)
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