活血潜阳颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血小板聚集及体外血栓形成的影响
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王佑华 周 端 杨建梅 曹 敏 苑素云 肖梅芳 金若敏
摘要：目的观察活血潜阳颗粒对急性血瘀模型走鼠血液流变学体外血栓形成各项指标的影响。方法采用皮下注射肾上腺素加冰水冷浴法造大鼠血瘀模型，观察活血潜阳颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学、血小扳聚集、纤维蛋白原及体外血栓形成影响。结果活血潜阳颗粒能降低急性血瘀证大鼠血液黏度、红细胞聚集指数、电泳指数，降低纤维蛋白原含量，抗血小板聚集及体外血栓形成。结论活血潜阳颗粒能改善血液流变学、抗血小板聚集及体外血栓形成。
关键词：活血潜阳颗粒；血癌证；血液流变学；血小板聚集性
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1349(2007)08-0699-02
活血潜阳方是基于活血化瘀、平肝潜阳治疗高血压病原则组方而成的，由丹参、潼白蒺藜等药物组成。前期临床与实验研究证实活血潜阳方具有有效降低血压、血栓素B2(TXBz)，升高前列腺素F1a，降低内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及改善高血压心血管重构等多种药理作用，但该方对血液流变学及体外血栓形成的影响有待明确。本实验对此做一探讨，以进一步阐明该方作用机制，为临床应用提供依据。
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1 材料与方法
1.1 实验用药活血潜阳颗粒由上海秀龙制药厂生产，批号：20040331；松龄血脉康，成都康弘制药有限公司，批号050127，箱号041；生理盐水由四川美大康佳乐药业有限公司生产，产品批号：05050833阿司匹林由上海信谊百路达药业公司，批号041103，用蒸馏水配制成0.417mg/mL的浓度。
1.2 仪器LBY—N6B旋转式血液黏度计、Nx—3型电泳仪、OPTION4 PLUS血凝仪购自上海普利生仪器公司。MR-4型多环血栓检测仪购自上海斯隆医电设备有限公司。
1.3 动物sD雄性大鼠130只，体重(200+20)g，购自上海西浦尔必凯实验动物有限公司，许可证SCXK2003-0002，分笼饲养，自由饮水，常规饲料。
1.4 方法
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1.4.1 活血潜阳颗粒对急性血瘀模型大鼠血液流变学影响①造模方法：参照文献[方法加以改进，建立大鼠急性血瘀证模型。SD雄性大鼠60只随机分6组，即活血潜阳大、中、小剂量组，松龄血脉康组，模型对照组，空白(盐水)组。大剂量组予活血潜阳颗粒1.92g/(kg·d)，中剂量组予活血潜阳颗粒0.96g/(kg·d)，小剂量组予活血潜阳颗粒0.48g/(kg·d)，松龄血脉康组予松龄血脉康1.8(kg·d)，以上各药均用双蒸水配制成溶液按5mL/(kg·d)剂量灌服。各组灌胃均每日1次，连续7d。模型对照组、空白组用盐水5mL/(kg·d)灌服。各组灌胃均在第7天上午给药后的30min，除正常组外，其余各组均皮下注射肾上腺素0.35mg/kg,4h后再次皮下注射肾上腺素0.35 mg/kg。处置后禁食，自由饮水。在第8天再次皮下注射肾上腺素0.35mg/kg。20min后，将大鼠置于0℃冰水中游泳5min。每组动物均以乌拉坦30 mg&g腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，肝素抗凝6mL。②检测方法：肝素抗凝，从加有抗凝剂的6mL全血中取出2mL加入LBY-N6B旋转式血液黏度计，分别测定低切(10/s)、中切(40/s)及高切(120/s)3个切变率下全血黏度，3mL全血以3000r/min离心10mitt，取上层血浆1 mL加入黏度计测120/s切变率下血浆黏度；微量毛细管法测定红细胞比容；以Nx-3型电泳仪测定红细胞电泳时间；1mL测红细胞沉降率；进一步推算红细胞聚集指数及红细胞电泳指数。
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1.4.2 活血潜阳颗粒对血小板聚集、纤维蛋白原及体外血栓形成的影响①造模方法：SD雄性大鼠70只，随机分7组，即活血潜阳大、中、小剂量组，松龄血脉康组，阿司匹林组，模型对照组，空白组。造模及给药、统计方法同前。每组动物均以乌拉坦30mg/kg腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，分为全血1.5mL、3.2%枸橼酸钠溶液(9:1)抗凝5mL。②检测方法：腹主动脉采血1.5mL，迅速注入血栓环内，放人体外血栓检测仪转盘上旋转15min后取下，将环内血栓倒在滤纸上，吸去余血，测量其长度、湿重、干重。3.8%枸橼酸钠溶液(9:1)抗凝取血5mL，800r/min离心10min，制备富血小板血浆(PRP)，再以3000r/min离心15min，制备贫血小板血浆(PPP)，以一定数量的PPP和PRP调节血浆光浊度为4000左右，以ADP(3μmol/L，磷酸缓冲液配制，上海蓝星公司)诱导，采用比浊法进行血小板聚集实验。以实验所得各鼠血小板最大聚集率，计算血小板聚集抑制百分率；3.8%枸橼酸钠溶液(9:1)抗凝取血，3000r/min离心15mln，分离血浆后用OPTION4 PLUS血凝仪测定血纤维蛋白原(纤维蛋白原试剂盒，上海太阳公司)含量。
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2 结果
2.1 活血潜阳颗粒对大鼠血液流变学的影响(见表1)
2.2 活血潜阳颗粒对血小板聚集、纤维蛋白原及体外血栓形成 的影响(见表2)
3 讨论
高血压病及其血栓性并发症是我国人口致死和致残的主要原因之一。研究结果表明，高血压病病人存在血液流变学异常改变，血液处于浓、黏、凝、聚状态，血栓形成率增高，血栓降解率降低，而且这些改变与高血压病的严重程度呈正相关。血浆纤维蛋白原增高既是影响红细胞聚集的重要因素，也是血栓形成的重要因素。血小板除了参与凝血过程外，对血栓形成和动脉粥样硬化也起到重要作用，在高血压病中的作用逐渐得到重视。
传统的中医学认为，肝肾朋虚、肝阳上亢是高血压病的主要发病机制，肝阳上亢证是原发性高血压的最常见病证类型。现代医家应用平肝潜阳法治疗原发性高血压取得了较好的疗效，但对血液流变学、血小板功能异常及血栓形成作用有限。立足于临床实践并结合前贤经验及相关研究，发现阳亢、血瘀为高血压病发病的基本病理环节，活血潜阳法是治疗高血压病的重要有效方法，且得到理论、临床与实验研究支持。
本实验结果表明，活血潜阳颗粒能不同程度降低急性血瘀证大鼠全血还原黏度、红细胞聚集指数、电泳指数，降低急性血瘀证大鼠纤维蛋白原含量，抗血小板聚集及体外血栓形成。证实活血潜阳法既乎肝潜阳，调整阴阳失衡，又活血化瘀，改善血液流变学、抗血小板聚集及体外血栓形成，比单纯用平肝潜阳法有明显的优越性，有望进一步提高中医药治疗高血压病及其并发症疗效，值得临床推广。
(本文编辑 郭怀印), 百拇医药(王佑华等)