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编号:11505691
加味丹参饮预处理对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞的延迟保护作用及对蛋白激酶C的影响(2)
http://www.100md.com 2007年10月1日 《中西医结合心脑血管病杂志》 2007年第10期
加味丹参饮预处理对乳鼠缺氧/复氧心肌细胞的延迟保护作用及对蛋白激酶C的影响

     95℃水浴中10 min以终止反应。每管加入85%的甘油1μL,充分混匀。0.8%琼脂糖凝胶电泳,电泳结束后取胶紫外灯下观察照相。切下磷酸化条带,尽量使其体积接近250 μL,将其放入一个1.5 mL带有刻度的离心管中,95℃加热至胶溶解。取175 μL热琼脂糖,与75 μL凝胶稳定溶液、100 μL冰醋酸和150wL双蒸水混匀。取500μL置于小杯中。570 nm比色,空白对照为液体琼脂糖。根据Lamber-Beer定律:A=εBC[式中:A为样品的吸光度,ε为摩尔吸光系数(L/mol.com),B为液层的厚度(比色皿的宽度),C为PepTag C1短肽浓度(mol/L)],计算摩尔吸光系数,并以此求得各样品中磷酸化C1肽含量。结果以units/mL表示(指每分钟每毫升转移到底物的mol磷酸的数量 ......
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