编码大鼠PRMTI基因shRNA质粒的构建和鉴定
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摘要：目的：研究蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)基因表达的改变与血管内皮功能及动脉粥样硬化的关系。方法：构建PRMT1短发夹RNA(shRNA)质粒。在GenBank中查到大鼠PRMT1基因mRNA序列并输入siRNA网上设计软件OptiRNA中，选取两条靶序列，设计并合成编码shRNA序列的DNA单链，经退火连接后，与双酶切线性化处理回收的pGenesil-1质粒载体连接，用含卡那霉素抗性的LB平板筛选阳性克隆，小提质粒后行酶切鉴定并测序。结果：构建的大鼠PRMT1-shRNA质粒经酶切鉴定及测序与预期相符。结论：本研究结果为进一步研究基因干扰PRMT1基因对血浆同型半胱氨酸(Hcy)、非对称性二甲基精氨酸(ADMA)水平及血管内皮功能的影响奠定了基础。
关键词：蛋白精氨酸甲基转移酶1；短发夹RNA；基因干扰；同型半胱氨酸；非对称性二甲基精氨酸；动脉粥样硬化
中图分类号：R349 文献标识码：A 文章编号：1672-1349(2008)03-0299-04
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