不同时间诱导后上清液在骨髓间充质细胞向神经元样细胞分化中的作用
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王飞 冯鹏 李光来
【摘要】目的研究体外使用音猬因子(SHH)、维甲酸(Ra)、Forskolin(Fn)组成的诱导体系诱导骨髓间充质细胞(BMSCs)后的上清液对BMSCs向神经细胞分化的作用。方法从健康志愿者髂骨处抽取骨髓4mL,体外分离、培养、扩增后用400ng/LSHH、0.5μmRa和5μmFn组成的诱导体系进行诱导,取诱导后6h、12h、24h、3d、5d和7d的诱导液上清分别作用于BMSCs。7d后使用倒置显微镜和免疫组织化学方法观察诱导前后细胞的变化。结果诱导7d后各组均有部分细胞胞体收缩、伸长突起,表现出神经细胞的形态。12h上清诱导组同SHH+Ra+Fn诱导组NSE、MAP-2阳性细胞比例高于其他组(P0.05),12h上清诱导组同SHH+Ra+Fn诱导组NSE、MAP-2阳性细胞比例无统计学意义(P0.05)。结论12h后上清液可有效诱导BMSCs向神经细胞分化。
【关键词】 骨髓基质干细胞 神经细胞 细胞分化 诱导后上清液
【分类号】R329
骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs)最初由德国病理学家Conhiem在实验中偶然发现,1968年Fridenstein等首先证实了BMSCs在骨髓组织中的存在。BMSCs是一种比较原始的骨髓基质细胞,属于成体干细胞中间充质干细胞的一种。近年来大量的研究结果表明BMSCs可
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摘要：目的：研究体外使用音猬因子(SHH)、维甲酸(Ra)、Forskolin(Fn)组成的诱导体系诱导骨髓间充质细胞(BMSCs)后的上清液对BMSCs向神经细胞分化的作用。方法：从健康志愿者髂骨处抽取骨髓4mL，体外分离、培养、扩增后用400ng/L SHH、0.5μm Ra和5μFn组成的诱导体系进行诱导，取诱导后6h、12h、24h、3d、5d和7d的诱导液上清分别作用于BMSCs。7d后使用倒置显微镜和免疫组织化学方法观察诱导前后细胞的变化。结果：诱导7d后各组均有部分细胞胞体收缩、伸长突起，表现出神经细胞的形态。12h上清诱导组同SHH+Ra+Fn诱导组NSE、MAP-2阳性细胞比例高于其他组(P<0.05)，12h上清诱导组同SHH+Ra+Fn诱导组NSE、MAR-2阳性细胞比例无统计学意义(P>0.05)。结论：12h后上清液可有效诱导BMSCs向神经细胞分化。
关键词：骨髓基质干细胞；神经细胞；细胞分化；诱导后上清液
中图分类号：R331 文献标识码：A 文章编号：1672-1349(2008)03-0306-03
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