三七总皂苷对人骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态的影响
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刘瑞玲 李光来 陈文超 山西医科大学第二医院;
【摘要】目的研究三七总皂苷(tPNS)与bFGF联合在人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)分化为神经元样细胞过程中的诱导作用及作用剂量。方法全骨髓贴壁法分离、培养、扩增、纯化hBMSCs,流式细胞仪检测hBMSCs表面CD29、CD44、CD105、CD34分子,测定周期。取第三代hBMSCs,含20%胎牛血清的1 mmol/Lβ-巯基乙醇(BME)预诱导24 h,继而用bFGF(20 ng/mL)标准组、tPNS(1 mg/mL)药物组、20 ng/mL bFGF+低、中、高剂量tPNS(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)诱导液诱导,设立空白对照组。采用免疫细胞化学法鉴定神经细胞特异性抗原标记神经元特异性烯醇化酶(NSE)、微管相关蛋-2(MAP-2)和神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。MTT法检测各组诱导后不同时间点对神经元样细胞活力的影响。结果成功分离培养hBMSCs,经诱导后大部分hBMSCs分化为神经元样细胞,联合诱导组细胞生长状态及活力较好,阳性细胞NSE、MAP-2比例高于对照组(P0.05),GFAP表达阴性。结论 tPNS与bFGF联合在体外能有效诱导hBMSCs分化为神经元样细胞,表达神经细胞特异性抗原,保持较好的活力、延长存活时间。
【关键词】 三七总皂苷 人骨髓间充质干细胞 神经元样细胞 诱导 分化
【分类号】R329;R285.5
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可分化为心肌细胞、脂肪细胞、内皮细胞,还能分化为非中胚层来源的神经元和神经胶质细胞等[1]。体外基因转染率高且传代稳定等优点[2]。间充质干细胞具有支持造血和免疫调节功能,因此越来越受到重视。三七总皂苷(t
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骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMscs)可分化为心肌细胞、脂肪细胞、内皮细胞，还能分化为非中胚层来源的神经元和神经胶质细胞等。体外基因转染率高且传代稳定等优点。间充质干细胞具有支持造血和免疫调节功能。因此越来越受到重视。三七总皂苷(total panax notog—inseng saponin，tPNs)是五加科植物三七的主要活性成分。本实验旨在初探tPNs和bFGF对人骨髓间充质干细胞诱导分化后神经元样细胞生长状态及凋亡的影响。
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