抗钠-钙交换体α-1抗体对Langendorff灌流大鼠心脏功能的影响
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封启龙 武冬梅 吴博威 山西医科大学生理学系细胞生理学省部共建教育部重点实验室;山西医科大学药理教研室;
【摘要】目的研究抗钠-钙交换体(NCX)α-1(117-137)肽段抗体对离体灌流大鼠心脏活动的影响,初步探讨其作用机制。方法用合成的NCXα-1(117-137)重复序列肽段主动免疫大鼠获取抗体,经纯化后通过Langendorff离体灌流装置观察其对心功能的效应;利用膜片钳系统观察抗体对单个心肌细胞钠-钙交换电流的影响。结果免疫后大鼠体内抗α-1(117-137)抗血清滴度明显增加,纯化后抗体浓度为1.0 mg/mL,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果只显示一条带,分子量与IgG标准品一致。在浓度为10 nmol/L2、0 nmol/L和40 nmol/L时,该抗体可剂量依赖性地降低离体灌流心脏左室发展压(LVDP)、左室压最大上升/下降速率(±dP/dtmax)。进一步研究发现,在10 nmol/L~40 nmol/L浓度范围内,抗NCXα-1抗体可剂量依赖性地抑制外向和内向钠-钙交换电流。结论抗NCXα-1(117-137)抗体对心肌收缩和舒张均表现出抑制效应,这一作用与其抑制钠-钙交换活动有关。
【关键词】 钠-钙交换体 抗体 心功能
【基金】山西省青年科学基金资助项目(No.2009021043-1)
【分类号】R541
钠-钙交换体(NCX)是心肌细胞膜上一类重要的跨膜转运体,它由Na+-K+-ATP酶形成的细胞内、外Na+浓度梯度提供能量,逆向跨膜转运Na+和Ca2+。在迄今为止所有已知的NCX分子中,都存在有进化上高度保守的重复序列,即“αre-peats”,包括α-1和α-2两个长度各约40个氨基酸的短肽序列,
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钠-钙交换体(Ncx)是心肌细胞膜上一类重要的跨膜转运体，它由Na+-K+-ATP酶形成的细胞内、外Na+浓度梯度提供能量。逆向跨膜转运Na+和ca2+。在迄今为止所有已知的Ncx分子中。都存在有进化上高度保守的重复序列，即“are-peats”，包括α-1和α-2两个长度各约40个氨基酸的短肽序列，其中α-1主要位于第2，3跨膜段之间，而α-2主要由第7跨膜段及其C端的氨基酸序列组成。近年来对NcX结构一功能关系的研究表明，α重复序列在NCX与其转运底物(Na+和Ca2+)、Ni2+抖、Lr+及其特异性阻断剂KB—R7943的相互作用中起关键作用，并可能参与形成了NCx的离子转运通路。
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