氧化低密度脂蛋白对THP-1细胞凋亡的影响及其机制的研究(2)
参见附件(12kb)。
图1 各组细胞GRP78、Caspase-12、CHOP蛋白的表达
3 讨 论
细胞凋亡是动脉粥样硬化病变的主要特征之一,其中巨噬细胞凋亡贯穿动脉粥样硬化的整个过程。巨噬细胞泡沫化及其最终凋亡的过程中泡沫细胞聚集坏死形成脂核并使其不断增大,导致临床事件发生[5]。内质网是细胞内蛋白质折叠和钙离子存储的主要场所，对多种生理功能的完成具有重要意义。然而，细胞内外环境的改变导致内质网腔内氧化环境被破坏，钙代谢紊乱，突变的蛋白质产生或蛋白质的二硫键不能形成，大量异常的蛋白质聚集在细胞内，内质网的稳态失衡，这种内质网功能紊乱状态被称为内质网应激[6]。 GRP78被认为是内质网稳态的中心调节剂，也被认为是内质网应激的标志，但是过强或时间过长的内质网应激可能会导致细胞死亡[7]。Caspase-12 激活是触发内质网应激相关凋亡途径的重要信号转导通路。Caspase-12 以酶原形式存在于内质网膜胞浆侧,在ERS 时被特异激活而诱导细胞凋亡[8]。CHOP也是触发内质网应激相关凋亡途径的重要信号转导通路。CHOP 又称生长停滞及DNA 损伤基因(Growth Arrestand DNA Damage Induciblegene 153,GADD 153),存在于细胞浆内,在ERS 时被活化转位至细胞核,通过下调Bcl-2 表达而促进细胞凋亡。 本实验以不同浓度的ox-LDL与THP-1细胞共同培养不同时间,结果发现ox-LDL以时间和浓度依赖的方式诱导THP-1细胞的凋亡。ox-LDL浓度为100 μg/mL作用48 h最明显。随着时间的延长和浓度增加THP-1细胞凋亡呈递增后递减变化。内质网应激启动的凋亡途径是近年才发现的一种新的凋亡途径，用ox-LDL培养人THP-1细胞并检测Caspase12、CHOP、GRP78蛋白的变化来探讨ox-LDL是否通过内质网应激途径诱导细胞凋亡。结果发现100 μg/mL 的ox-LDL作用于细胞48 h后,GRP78、Caspase-12、CHOP的表达都明显增加,提示ox-LDL可以通过内质网应激引发细胞凋亡。 不同于线粒体介导的凋亡途径，ERS引起的细胞凋亡有一套自身的信号传递通路，称为内质网相关性死亡(ER-associated death，ERAD)途径，而且参与ERS 的分子伴侣和感受蛋白是ERS 特异诱导的，因此能够作为治疗相关疾病的有效靶点。
参考文献:
[1] Rossi ML,Marziliano N,Merlini PA,et al.Different quantitative apoptotic traits in coronary atherosclerotic plaques from patients with stable angina pectorisandacutecoronarysyndromes[J].Circulation,2004,110(13):767-773. ......
图1 各组细胞GRP78、Caspase-12、CHOP蛋白的表达
3 讨 论
细胞凋亡是动脉粥样硬化病变的主要特征之一,其中巨噬细胞凋亡贯穿动脉粥样硬化的整个过程。巨噬细胞泡沫化及其最终凋亡的过程中泡沫细胞聚集坏死形成脂核并使其不断增大,导致临床事件发生[5]。内质网是细胞内蛋白质折叠和钙离子存储的主要场所，对多种生理功能的完成具有重要意义。然而，细胞内外环境的改变导致内质网腔内氧化环境被破坏，钙代谢紊乱，突变的蛋白质产生或蛋白质的二硫键不能形成，大量异常的蛋白质聚集在细胞内，内质网的稳态失衡，这种内质网功能紊乱状态被称为内质网应激[6]。 GRP78被认为是内质网稳态的中心调节剂，也被认为是内质网应激的标志，但是过强或时间过长的内质网应激可能会导致细胞死亡[7]。Caspase-12 激活是触发内质网应激相关凋亡途径的重要信号转导通路。Caspase-12 以酶原形式存在于内质网膜胞浆侧,在ERS 时被特异激活而诱导细胞凋亡[8]。CHOP也是触发内质网应激相关凋亡途径的重要信号转导通路。CHOP 又称生长停滞及DNA 损伤基因(Growth Arrestand DNA Damage Induciblegene 153,GADD 153),存在于细胞浆内,在ERS 时被活化转位至细胞核,通过下调Bcl-2 表达而促进细胞凋亡。 本实验以不同浓度的ox-LDL与THP-1细胞共同培养不同时间,结果发现ox-LDL以时间和浓度依赖的方式诱导THP-1细胞的凋亡。ox-LDL浓度为100 μg/mL作用48 h最明显。随着时间的延长和浓度增加THP-1细胞凋亡呈递增后递减变化。内质网应激启动的凋亡途径是近年才发现的一种新的凋亡途径，用ox-LDL培养人THP-1细胞并检测Caspase12、CHOP、GRP78蛋白的变化来探讨ox-LDL是否通过内质网应激途径诱导细胞凋亡。结果发现100 μg/mL 的ox-LDL作用于细胞48 h后,GRP78、Caspase-12、CHOP的表达都明显增加,提示ox-LDL可以通过内质网应激引发细胞凋亡。 不同于线粒体介导的凋亡途径，ERS引起的细胞凋亡有一套自身的信号传递通路，称为内质网相关性死亡(ER-associated death，ERAD)途径，而且参与ERS 的分子伴侣和感受蛋白是ERS 特异诱导的，因此能够作为治疗相关疾病的有效靶点。
参考文献:
[1] Rossi ML,Marziliano N,Merlini PA,et al.Different quantitative apoptotic traits in coronary atherosclerotic plaques from patients with stable angina pectorisandacutecoronarysyndromes[J].Circulation,2004,110(13):767-773. ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(12kb)。