血栓心脉宁片抑制急性血瘀大鼠血栓形成的研究
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摘要：目的 观察血栓心脉宁片对急性血瘀大鼠血液流变学的影响，及其体外抗血栓形成的作用。方法 采用两次注射肾上腺素加冰水浴的方法建立急性血瘀大鼠模型，观察血栓心脉宁片对大鼠血液流变学的影响及对体外血栓形成的影响。结果 血栓心脉宁片高、中、低剂量组对急性血瘀大鼠全血黏度及血浆黏度均有明显的改善作用，且均有抑制其体外血栓形成的作用，以中剂量组效果最为明显，与脑心通胶囊具有相似的作用。结论 血栓心脉宁片具有改善急性血瘀大鼠血液流变学及抗血栓形成的作用。
关键词：血栓心脉宁片；急性血瘀大鼠；血液流变学；血栓形成
中图分类号：R54 R285.5 文献标识码：A 文章编号：1672-1349(2012)01-0078-02
血栓心脉宁片是纯中药制剂，主要由川芎、丹参、水蛭、毛冬青、牛黄、麝香、槐花、人参茎叶皂苷、冰片、蟾酥等组成。该药具有益气活血、开窍止痛功能，用于气虚血瘀所致的脑卒中、胸痹，症见头昏目眩、半身不遂、胸闷心痛、心悸气促；缺血性脑卒中恢复期、冠心病、心绞痛等[1]。本实验观察血栓心脉宁片对大鼠血液流变学的影响，及抗血栓形成的作用。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器 Wistar大鼠60只，雌、雄各半，体重200 g~220 g，由吉林大学白求恩医学院试验动物中心提供，质量合格证号：SCXK-(吉)2009-0001。血栓心脉宁片，由吉林华康药业股份有限公司提供，国药准字Z20030145,产品批号：110601；脑心通胶囊，陕西步长制药有限公司，国药准字Z2025001，产品批号：110764。盐酸肾上腺素注射液，上海禾丰制药有限公司出品，批号：110302；LT电子天平(深圳市力源检测仪器有限公司)；TDL80-2B飞鸽牌离心机(哈尔滨东联电子技术开发有限公司)；KES-900B型血流变检测仪(无锡康尔生仪器公司)；体外血栓形成仪(北京科临易检信息技术有限公司)；DHG-9053A型电热恒温干燥箱(上海医用恒温设备厂)。
1.2 方法
1.2.1 动物分组 取血栓心脉宁片，配成浓度为3.5%、7.0%、14.0%高、中、低剂量供试药液；脑心通胶囊，配成浓度为8.0%的阳性对照药液；肾上腺素，配成浓度为0.1%的溶液；水合氯醛，配成浓度为10%的溶液。
自试验动物中心引入Wistar大鼠后，适应性饲养一周，室温22 ℃~25 ℃，湿度40%～60%。将大鼠按体重随机分为6组，每组10只，雌、雄各组均分，分组为正常对照组、血瘀模型组及血栓心脉宁片高剂量组、中剂量组、低剂量组，脑心通胶囊阳性对照组。
试验过程中正常对照组正常饲养，血瘀模型组给水10mL/kg，各给药组均给予10 mL/kg供试药液。每日09：00时灌胃给药，连续给药7 d。
1.2.2 血瘀模型的制备 第6天灌胃给药后30 min，除正常对照组外，其余各组动物均皮下注射0.1%肾上腺素0.8 mL/kg，2 h后于冰水中浸泡5 min，再过2 h后给予同剂量的肾上腺素以复制急性血瘀模型[2]。
1.2.3 血液流变学的测定[3] 大鼠复制急性血瘀后模型，禁食不禁水12 h，第7天末次给药30 min后，腹腔注射10%水合氯醛3 mL/kg 麻醉，腹主动脉取血[4]，置于肝素抗凝管中。取其中全血1 mL置于血流变检测仪，测定全血低切(20/s)、中切(60/s)及高切(150/s)黏度，余下全血离心10min(3000r/min)，取上层血浆 1 mL测定血浆黏度(140/s)。
1.2.4 体外血栓形成的测定 大鼠复制急性血瘀模型后，禁食不禁水12 h，第7天末次给药30 min后，大鼠腹腔注射10% 水合氯醛3 ml/kg 麻醉，腹主动脉取血1.8 mL，注入硅胶管中，迅速密封，置于体外血栓形成仪上旋转15 min，倾出血栓，在滤纸上吸干残血，测量血栓长度及血栓湿重，再将血栓置于烘箱50 ℃烘干后称量其干重[5]。
1.3 统计学处理 应用GraphPad Prism 5.0处理，数据以均数±标准差(x±s)表示，两组间比较采用t检验。
2 结 果
2.1 对血液流变学的影响 急性血瘀模型组与正常对照组比较，全血低、中、高切黏度及血浆黏度均明显增加(P<0.05)，大鼠急性血瘀模型造模成功。与急性血瘀模型组比较，血栓心脉宁片低、中、高剂量组可使血瘀模型大鼠全血低、中、高切黏度及血浆黏度显著降低(P<0.05)。详见表1。
2.2 对体外血栓形成的影响 与急性血瘀模型组比较，血栓心脉宁片各组均可使血瘀模型大鼠血栓形成长度、血栓湿重及血栓干重显著降低(P<0.05)。详见表2。
3 讨 论
血瘀证是由于血液瘀滞、运行不畅而产生的病理症候[6，7]，此时血液呈高黏、聚、凝状态。本实验给大鼠皮下注射大剂量肾上腺素模拟暴怒时的机体状态, 以冰水浸泡法模拟外寒侵袭,在两种因素综合作用下复制大鼠急性血瘀证模型, 此模型使外周血管强烈收缩,心脏后负荷增加,心肌耗氧量增加,心功能逐渐下降,使血液运行障碍[8],因此，该模型常用于中医血瘀证及活血化瘀药的研究[9，10]。周卫等[11-13]的相关研究表明，肾上腺素加冰水以复制急性血瘀动物模型的方法可行。
血液流变学是研究构成血液循环的血液及血管的流动性和变形的科学，也是研究血液的流动性质和凝固性质及红细胞的粘弹性和变性的科学。其改变与许多疾病,尤其是血栓性疾病的发生、发展密切相关。血液流动性下降,流变性异常,凝固性增高,从而导致血流缓慢,形成血栓[14]。因此，观察血栓心脉宁片对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响,符合中医活血化瘀药物的治疗原则[15]。
体外血栓形成实验是模拟体内血栓形成过程制备成模拟血栓, 通过测定体外血栓形成长度、血栓湿重和干重, 可借以推测在体血管内凝血形成血栓的可能程度[16]。这些指标能够直观地反映出被检者的血凝状态，因此可以通过体外血栓形成试验来观察血栓心脉宁片对于急性血瘀模型大鼠的抗血栓作用。
参考文献：
[1] 明磊，王鹏.血栓心脉宁片中无机元素成分分析[J].中国当代医药，2010,16(6)：60-62.
[2] Dan B,Andrew G.Chinese herbal medicine materia medica[M].Revised Edition.Washington:Eastland Press,1993:265-266.
[3] Li Haixia,Han Shuyan.Effect of the carthamins yellow from Carthamus tinctorius L.on hemorheological disorders of blood stasis in rats[J].Food Chemical Toxicology,2009,47(8):1797-1802.
[4] 车兆义,邹悦,宋清斌.大鼠实验中几种常用的采血方法探讨[J].局解手术学杂志,2008,17(2):84-85 ......
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