拉莫三嗪和乙琥胺对颞叶癫痫的神经可塑性实验研究(2)
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参见附件。
2.2 脑电图观察 正常对照组大鼠EEG以5 Hz～10 Hz的低波幅α、β波为主，波幅以50 μV～100 μV为主。慢性期模型组大鼠EEG表现为背景节律增快，阵发性尖棘波、多棘波、多尖波发放，波幅均大于200 μV；LTG低、高剂量干预后脑电图均有改善，节律减慢，棘波、尖波减少，波幅降低，且以高剂量组改善明显；ETX低、高剂量干预组和模型组脑电图无明显差别，仍节律性出现尖波、棘波，频率快，波幅高。
2.3 苔藓纤维发芽(见表2) 海马齿状回颗粒细胞苔藓纤维终末富含Zn+，硫化银对Zn+特异性染色呈棕黄或黑色颗粒。正常对照组大鼠齿状回及CA3区齿状颗粒细胞轴突分布区有密集浓染的黑色颗粒，极少见到有苔藓纤维穿越齿状回颗粒细胞层到齿状回内分子层及CA3区椎体细胞始层；模型组可观察到有较多的苔藓纤维穿过颗粒细胞进入内分子层和CA3区，表现为片状出芽；LTG低、高剂量组Timm染色可见点状或稀疏状出芽；ESX低、高剂量组齿状回和CA3区同样可见片状出芽。通过对各组大鼠齿状回和CA3区MFS评分统计得出： LTG高、低剂量组与模型比较差异有统计学意义，LTG低、高剂量组间比较差异有统计学意义。LTG各组均可抑制齿状回和CA3区苔藓纤维发芽，且以高剂量组效果显著；ESX高、低剂量组与模型组比较无统计学意义，ESX低、高剂量组间比较无统计学意义。ESX 各组不能抑制苔藓纤维向齿状回和CA3区发芽。
3 讨 论
通过本实验得出，LTG可以抑制慢性期自发性癫痫反复发作，改善脑电图的表现。Jari Nissinen[5]在杏仁核点燃诱发的颞叶癫痫的研究中发现，LTG可以减少84%的自发性癫痫，发作次数减少多于50%的占88%。但在匹罗卡品诱导的颞叶癫痫上，目前尚无相关文献报道。本研究发现LTG低、高剂量组均能减少慢性期自发性癫痫的反复发作，可以抑制癫痫的发生，尤以高剂量组效果显著。LTG可以有效地改善慢性期癫痫大鼠的脑电图，减少痫性波的频率，降低痫性波的波幅，与行为学观察结果一致。LTG的抗癫痫机制包括抑制电压依赖性钠通道，稳定细胞膜防止异常放电，抑制突触前膜谷氨酸盐释放等[6]。在此模型中Remy等[7]研究发现，与模型组相比，LTG可以阻断64%钠离子通道开放，从而抑制异常放电，减少痫性发作。
Leite等[2]在此模型上使用ESX，发现ESX不能减少慢性期大鼠自发性癫痫反复发作的次数，对此模型无效，本实验的结论与上述一致。Jari等[5]刺激杏仁核诱发颞叶癫痫的模型里，ESX减少大鼠自发性癫痫大于50%的占38%，剩余的大鼠发作次数减少不明显或增加发作次数，这与本实验的观察结果相似。ESX干预后慢性期脑电图与无药物干预的癫痫大鼠相比无明显改善，同样符合行为学观察结果。ESX的药理作用与抑制T型Ca2+通道有关，ESX可以抑制丘脑细胞低阈值T型Ca2+电流，从而阻断丘脑3 Hz/s的异常放电，而丘脑神经元T型Ca2+ 电流是形成失神发作3 Hz/s的棘慢复合波的基础结合本实验与以往的研究发现ESX对颞叶癫痫的发生无预防作用，推测ESX可能对颞叶的异常放电不起作用。
业已证实，海马损伤是癫痫发生的结果，又是颞叶癫痫形成的原因。苔藓纤维发芽(mossy fiber sprouting,MFS)是一种常见的颞叶海马损伤的表现，MFS是一种神经再生现象，即海马齿状回颗粒细胞的轴突在齿状回内分子层，CA3区下椎体层的异常生长。多数学者认为是由门区及CA3区的神经元死亡所诱发的，神经元的兴奋性递质的释放、凋亡以及缺失可以诱发MFS和突触重构[8]。苔藓纤维为兴奋性氨基酸能神经纤维，MFS将抑制性环路变成兴奋性环路，增加了发作敏感性从而促进癫痫的形成，成为SRS的主要原因[9]。李国良等[10]发现匹罗卡品模型慢性期MFS随着时间的延长，出芽越显著，SE后30 d最显著，以后出芽缓慢，SE后60 d与30 d相比无明显变化。本实验观察SE后30 d的MFS变化，发现与模型组比较LTG低、高剂量组均能抑制苔藓纤维向门区及CA3区椎体细胞延伸，高剂量组作用显著。LTG抑制MFS机制尚不明确,在Smolders等[11]的电刺激诱发SE的实验中，通过微注射LTG的方法，观察发现LTG能影响海马中谷氨酸、GABA以及多巴胺的含量，从而减少慢性期SRS 次数和抑制MFS,其干预机制较为复杂，推测可能与兴奋性与抑制性环路有关，并未明确。以往的实验中并没有ESX在病理学方面的进一步研究，通过我们的研究发现，ESX不能抑制苔藓纤维向齿状回和CA3区出芽。我们的实验从病理学的方面支持行为学和脑电图的表现，为以往的观点提供了更多的证据。
下一步我们的研究要从各期兴奋性与抑制性氨基酸递质水平变化与神经可塑性的关系着手，揭示LTG对各期每种递质的影响以及递质变化和MFS之间的关系。
参考文献：
[1] Kreak P，Mikudecka A ......
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