黄芪甲苷对人外周血内皮祖细胞体外血管生成能力的影响(2)
1.2.8 EPCs血管生成能力的检测 采用体外血管生成试剂盒检测体外内皮祖细胞的血管生成能力。200倍倒置显微镜下观察小(血)管生成情况。选择200倍光镜下5个视野,计数小管数。细胞拉长变形,长度为宽度的4倍以上即可被认为形成小管。2 结 果
2.1 EPCs的细胞形态学特征及鉴定 细胞形态学显示,刚分离的细胞呈圆形不贴壁,4 d可以观察到椭圆形、短梭形细胞;培养第7天,梭形细胞逐渐增多。
外周血获取的单个核细胞接种在细胞培养板内,培养7 d后对贴壁细胞进行细胞鉴定分离获得的单个核细胞,培养7 d用FITCUEAI和DiIacLDL对细胞进行染色。通过共聚焦显微镜,DiIacLDL、FITCUEAI双染色阳性细胞(呈黄色)被认为是正在分化的内皮祖细胞。
外周血获取的单个核细胞培养7 d后,采用流式细胞仪检测细胞表面标志,其中表达CD133(18.73±7.12)%,CD34(32.15±8.68)%,KDR(69.45±8.21)%,进一步证明获得的细胞为内皮祖细胞。
2.2 不同浓度黄芪甲苷对体外培养EPCs生物学功能的影响(见表1)
3 讨 论
血管内皮的损伤和修复保持着动态平衡 ......
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