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编号:12663671
激肽释放酶对氧糖剥夺皮层神经元线粒体运动调节蛋白的影响(1)
http://www.100md.com 2014年4月1日 崔梅 陈方哲 陈淑芬 陆征宇 董强
    参见附件。

     摘要:目的 研究激肽释放酶(TK)对氧糖剥夺皮层神经元线粒体运动调节蛋白的影响。方法 将培养7 d 的大鼠皮层神经元随机分为4 组:正常培养组(C 组)、正常培养+TK组(C+TK 组)、氧糖剥夺组(OGD组)、氧糖剥夺+TK组(OGD+TK 组)。C 组正常培养方法培养;C+TK组在正常培养的神经元培养液中加入TK使其终浓度为100 nmol/L后按正常培养24 h;OGD组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理;OGD+TK组神经元用100 nmol/L TK处理24 h 后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。对各组进行神经元纯度鉴定,细胞存活率、细胞Caspase-3相对活性检测,并且Western Blot测定线粒体运动调节蛋白Miro1、Miro2 和Milton 的表达。结果 TK可明显改善OGD损伤后神经元的存活率,降低细胞Caspase-3相对活性,并可以显著逆转OGD所导致的神经元线粒体运动调节蛋白Miro1、Miro2、Milton的表达变化。结论 TK具有明显的拮抗OGD损伤皮层神经元的作用,其机制可能和TK干预线粒体运动调节蛋白表达有关。

    关键词:激肽释放酶;氧糖剥夺;神经元;细胞培养;线粒体运动调节蛋白

    中图分类号:R329.3 R277.7 文献标识码:A

    doi:10.3969/j.issn.1672-1349.2014.04.048

    文章编号:1672-1349(2014)04-0478-03

    组织激肽释放酶(tissu kallikrein,TK)是激肽释放酶-激肽系统(kallikrein - kinin system ......
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    崔梅 陈方哲 陈淑芬 陆征宇 董强 复旦大学附属华山医院;

    【摘要】目的研究激肽释放酶(TK)对氧糖剥夺皮层神经元线粒体运动调节蛋白的影响。方法将培养7d的大鼠皮层神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、正常培养+TK组(C+TK组)、氧糖剥夺组(OGD组)、氧糖剥夺+TK组(OGD+TK组)。C组正常培养方法培养;C+TK组在正常培养的神经元培养液中加入TK使其终浓度为100nmol/L后按正常培养24h;OGD组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理;OGD+TK组神经元用100nmol/L TK处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理。对各组进行神经元纯度鉴定,细胞存活率、细胞Caspase-3相对活性检测,并且Western Blot测定线粒体运动调节蛋白Miro1、Miro2和Milton的表达。结果 TK可明显改善OGD损伤后神经元的存活率,降低细胞Caspase-3相对活性,并可以显著逆转OGD所导致的神经元线粒体运动调节蛋白Miro1、Miro2、Milton的表达变化。结论 TK具有明显的拮抗OGD损伤皮层神经元的作用,其机制可能和TK干预线粒体运动调节蛋白表达有关。

    【关键词】 激肽释放酶 氧糖剥夺 神经元 细胞培养 线粒体运动调节蛋白

    【基金】国家自然科学基金资助项目(No.81000487,81171023) 上海市科委课题资助(No.11QA1400900)

    【分类号】R965

    组织激肽释放酶(tissu kallikrein,TK)是激肽释放酶-激肽系统(kallikrein-kinin system,KKS)的重要组成部分,主要通过其底物的酶解产物激肽,间接激活缓激肽B1受体(B1R)和B2受体(B2R)而参与体内许多生理和病理过程[1]。近年大量研究已经证实TK或TK基因对缺血再灌注损伤具有明

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