人心包外脂肪干细胞原代培养(2)
1)为山西省自然科学基金(No.20100110552)加至细胞爬片,室温下10 min,吸出后PBS洗3次。抗荧光淬灭封片剂封片,于共聚焦显微镜下观察并拍照。
2 结 果
2.1 倒置显微镜下观察细胞形态 原代培养于培养皿中的细胞呈圆形及椭圆形,培养液上漂浮有脂滴,(6~8)h开始贴壁,70 h细胞基本完成贴壁。首次传代后细胞长梭形,呈簇状、旋涡状生长排列,6 d~7 d后贴壁细胞可基本铺满瓶底,细胞为单一的梭形成纤维样,呈放射状或平行排列,形态趋于一致,HE染色后细胞核呈蓝色,胞质成粉红色,形态为长梭形。
2.2 细胞免疫学检测 第3代呈对数期生长的人心包外脂肪干细胞经CD44抗原和DAPI染色后,共聚焦显微镜下见所有人心包外脂肪干细胞细胞核均已被标记蓝色荧光,胞体显示红色荧光。经CD90抗原和DAPI染色后,共聚焦显微镜下见所有人心包外脂肪干细胞细胞核均已被标记蓝色荧光 ......
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