益气复脉合剂抗心律失常作用机制研究(2)
1.2 方法 空白对照组(WT)给予蒸馏水3.48mL/(kg·d)灌胃;中药组(CM)给予益气复脉合剂3.48 mL/(kg·d)灌胃,给药7 d,采用胶原酶法急性分离大鼠左心室肌细胞。于术前15 min腹腔注射肝素(1 000 U/kg),10%水合氯醛溶液(0.35 g/kg)麻醉,开胸,迅速取出带有一段主动脉的心脏,置于4 ℃台式液中清理和冲洗残余血液,并迅速挂于Langendorff装置上进行主动脉逆行灌注,在36.7 ℃,6 mL/min,恒速灌流。100%氧气饱和的有钙台式液灌流约3 min后切换100%氧气饱和的无钙台式液灌流5 min,然后迅速切换消化液循环灌流,并持续通以100%氧气。灌流中同步监测灌注压,当灌注压恢复到略低于初始灌流压力时,终止消化,此时心脏颜色变浅,触之松软。用10 mL无钙台氏液灌流冲洗残余消化液,然后于KB液中剪取左心室。用眼科剪沿心室中部横轴剪开心脏,置入KB液中,撕碎,以吸管小心吹打,200目筛网过滤,500 r/min离心约30 s。弃去上清液,更换KB液一次,间隔6 min再次更换KB液,KB液中保存 ......
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