光滑假丝酵母菌耐药基因CDR1、CDR2、SNQ2表达的研究(2)
1.2.5 实时定量PCR反应 采用双标准曲线相对定量、Taq Man@Probe法扩增目的基因和管家基因。20.0ul反应体系:Premix Ex Taq(2×)l0.0ul,PCR Forward Primer、PCR Reverse Primer、荧光探针溶液浓度均为10uM,各加人0.4ul,ROX Reference DyeⅡ(50×)0.4ul,cDNA模板(1ng/u1)2.0ul,dH206ul。标准品浓度为25n/ul、5n/ul、1ng/ul、0.2n/ul、0.04n/ul。反应程序为两步法:95℃30sec,95℃ 5see,60℃34sec,50cycles。以其中一株为对照样本,计算各菌株目的基因表达的相对值。1.2.6 统计分析 采用统计软件SPSS17.O对数据进行分析。
2 结果
2.1 药敏结果
34株光滑假丝酵母菌中,有2株为敏感株(S),2株对ITR剂量依赖敏感(SDD),8株对三唑类药物全部耐药和22株呈现交叉耐药(R) ......
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