精子上游器的研制及其实验效果(2)
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1.2设备和材料
1.2.1实验仪器精液分析仪：北京清华同方股份有限公司；离心机：北京白洋离心机有限责任公司；生物显微镜：Olympus CX21；CO2培养箱：FH90香港力康生物医疗科技控股有限公司；百级超净工作台：苏州佳宝净化工程设备有限公司；移液管：美国BD Falcon公司；试管：美国BD Falcon 公司；离心管： 美国BD Falcon公司。
1.2.2试剂EARLE’s平衡盐溶液：美国Sigma-Aldrich公司；代血清(SSS)：美国 Irvin Scientific公司。
1.3精液收集
30份精液样本取自到山东大学附属济南市中心医院生殖医学科做精子质量检测的男性。男性年龄24～40岁，平均(30.57±3.36)岁。根据《WHO人类精液及精子-宫颈黏液相互作用实验手册(第四版)》[6]，取精前均禁欲2～7d。所有精液通过手淫方式全部收集在一洁净的60mL广口样品杯内。此样品杯已通过精子毒性检测，在实验室被广泛应用。精液分析之前液化至少30min。精液收集到精液检测开始的时间间隔不超过60min。精液量≥2mL；精子浓度≥20×106/mL；a+b级(前向运动)精子≥20%。符合本实验精液入选标准。
1.4精液分析
应用精液分析系统常规对精液样本分析后，按体积将精液平分为两份，分别进入实验组与对照组进行处理。
1.5上游液的制备
精子上游液(含10%代血清(SSS)的Earle’s平衡盐溶液)：9mL earl’s液+1mL SSS，置37℃、5%CO2浓度的培养箱中过夜平衡。
1.6方法
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