高迁移率蛋白A2在睾丸肿瘤组织中的表达及临床意义(2)

http://www.100md.com 2016年7月1日 《中国性科学》2016年第7期

     1.2方法

    1.2.1荧光定量PCR检测HMGA2mRNA的表达差异GenBank上查找目的基因mRNA序列，在CDS区设计特异性引物。GAPDH：F： 5-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3，R： 5-GAAGGTGAAGGTCGGAGTC-3。HMGA2：F： 5-CGAAAGGTGCTGGGCAGCTCCGG-3， R： 5-CCATTTCCTAGGTCTGCCTCTTG-3。反应条件：5×SYBR GreenⅠPCR buffer 10μL，上游引物F(10pmol/μL)和下游引物R(10pmol/μL)各1μL，dNTPs(10mM)1μL，Taq酶(3U/μL)1μL，ddH2O 31μL。反应条件为：95℃预变性5min，然后94℃40s，58℃退火40s，72℃45s，共40个循环。最后采用相对定量方法统计实验结果 ......