王雪，荆紫琪，李妍怡，李楚，闫天月，黄晓滨，张玉杰，马鹏凯(北京中医药大学中药学院，北京 102488)

    二氢丹参酮Ⅰ(dihydrotanshinone Ⅰ，DHT)是从中国传统植物丹参的根茎中提取出的一种脂溶性菲醌类成分，具有扩张冠状动脉和改善心肌缺血等作用[1]。研究表明，DHT对卵巢癌、肝癌、胃癌等多种恶性肿瘤均具有良好的治疗作用[2-5]。尽管DHT具有极高的药用价值，但存在水溶性差、靶向性差、副作用大等问题，极大限制了其临床应用和新药开发。

    聚合物纳米粒是以适当的载体材料与药物结合形成的具有纳米尺度的药物制剂[6-7]。纳米粒作用优势在于药物可包封于纳米粒中以提高溶解度，通过其纳米尺度特有的肿瘤增强的渗透和滞留效应(EPR效应)选择性在肿瘤部位聚集，实现被动靶向功能[8]。并且可通过各类功能分子对聚合物材料进行修饰实现特定功能，如针对肿瘤细胞过表达的受体或抗原，通过氨基酸、糖类、多肽和抗体等对纳米粒进行修饰，利用配体-受体或抗原-抗体的特异性相互作用，进一步提高纳米粒对肿瘤细胞的主动靶向能力，增强肿瘤细胞摄取，增加胞内药物浓度以提高药效[9-10]。

    近年来，以免疫检查点阻断(immune checkpoint blockade，ICB)为代表的免疫疗法逐渐成为肿瘤治疗主流[11-13]。目前以程序性死亡受体-1(programmed death 1，PD-1)及其配体1(programmed death 1 ligand 1，PD-L1)[14]为靶点的免疫检查点阻断疗法最为成熟[15]。阿替利珠单抗(atezolizumab，ATEZO)是针对PD-L1的人源化免疫球蛋白G1单克隆抗体，通过作用于肿瘤细胞过表达的PD-L1，阻止PD-1和PD-L1相互结合，激活免疫细胞杀伤肿瘤[16-19]。有研究发现，通过抗PD-L1单抗或多肽修饰纳米载体[20]，可以提高药物对肿瘤组织靶向性，与化疗药物产生协同治疗作用，更好地治疗肿瘤。

    基于此，本研究以聚乳酸-羟基乙酸-聚乙二醇-马来酰亚胺(PLGA-PEG-Mal)为载体材料，制备载DHT纳米粒，提高DHT生物利用度及肿瘤组织靶向性，并在纳米粒表面修饰ATEZO，制备主动靶向PD-L1的ATEZO DHT NP，进一步提高肿瘤细胞靶向性和胞内药物浓度，提高抗肿瘤药效。

    1 材料

    1.1 动物

    7周龄BALB/c雄性裸鼠36只，体重(20±2)g[北京维通利华生物技术有限公司，合格许可证号：SCXK(京)2021-0006] ......