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编号:619033
基于TLR4、NF-κB信号通路探讨当归拈痛汤治疗痛风性关节炎的作用机制
http://www.100md.com 2023年11月3日 中南药学 2023年第10期
双氯芬,滑膜,造模,1材料,1试药,2动物,3仪器,2方法,1网络药理学预测,2实验用药制备,3实验分组及造模,4实验给药,5实验取材与检测,6统计分析,3结果,1网络药理学研究,2动物
     刘毓,杨钊田,孙理军(陕西中医药大学,陕西 咸阳 712046)

    痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)是由于嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄减少致使尿酸盐在关节囊、滑膜囊、软骨、骨质等处沉积结晶而引起的慢性关节炎[1],证属中医学“痹证”范畴,发作时关节红肿热痛,湿热蕴结、阻滞关节等是其基本病机[2-4]。目前,GA急性发作期的主要治疗方法包括抑制炎症反应、促进尿酸排泄,但临床效果不理想,不良反应明显[5]。当归拈痛汤具有清热利湿、疏风止痛的效果,治疗GA有较好的疗效[6]。基于此,本研究利用网络药理学方法挖掘当归拈痛汤改善GA的潜在作用靶点及信号通路,结合体内实验验证,探讨当归拈痛汤对GA的作用机制,为当归拈痛汤用于临床治疗提供理论基础和依据。

    1 材料

    1.1 试药

    当归拈痛汤组成为羌活15 g,防风9 g,升麻3 g,葛根6 g,麸炒白术3 g,当归9 g,党参6 g,甘草15 g,苦参6 g,黄芩3 g,盐知母9 g,茵陈15 g,猪苓9 g,盐泽泻9 g,苍术9 g(陕西中医药大学第二附属医院)。双氯芬酸钠缓释片(规格:75 mg/片,北京诺华制药有限公司,批号:H10980297)。尿酸钠盐(MSU,美国Sigma公司,货号:U2875-5G),HE染液(珠海BASO公司,货号BA4025),Anti-NFκBp65(RELA)抗体(武汉boster公司,货号A00284-1),抗兔/抗小鼠二抗(上海威奥公司,货号WB0177/WB0176),IL-1β、IL-13 ELISA试剂盒(武汉boster公司,货号分别为EK0393、EK0900),TNF-αELISA试剂盒(NOVUS公司,货号VAL902)。

    1.2 动物

    SPF级雄性SD大鼠24只,体重(200±20)g [成都达硕实验动物有限公司,动物生产许可证号:SCXK(川)2020-030],22~27℃饲养于陕西中医药大学中药药理实验室动物房,动物自由饮水摄食。本研究中动物实验经陕西中医药大学动物伦理委员会批准同意(批件号:SUCMDL20210305006)。

    1.3 仪器

    BX51显微镜(日本奥林巴斯),165-8001电泳仪、170-3930转膜仪(美国Bio-Rad),TL-2010S组织匀浆器(北京鼎昊源公司),Fresco21台式高速冷冻离心机、MutiskanTM GO全波长酶标仪(美国Thermo),TGL-16B高速台式离心机(上海安亭公司) ......

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