痰液厚涂片检查结核菌方法的探讨
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中图分类号:R446.5
文献标识码: A
文章编号: 1672-3783(2009)-10-0031-02
【摘 要】本文拟痰液厚涂片方法检查结核病40例。着重对涂片厚度、痰量、染色、脱色时间等的影响进行了观察,并对三种不同的加温染色方法进行了比较。其结果,痰厚涂片痰量以0.1mL最佳,三种不同的加温染色方法以“间接加温法”最佳,适合现目前推广应用。
【关键词】痰液厚涂片;结核菌
痰液厚涂片查结核菌方法简单易行,且采用厚涂片查痰能提高抗酸杆菌的检出率,已为很多报告所证实。
1 涂片厚度与痰量
取40例痰标本中可凝部分0.1、0.15、0.3mL分别均匀涂布在玻片中长25mm、宽20mm的椭圆形范围。染色后观察痰膜完好情况、脱色情况和抗酸杆菌检出率。如表1所示,以0.1mL为最佳。
2 染色方法
2.1 萋-纳氏抗酸染色法(ziehi-reelsen)
2.2 染色液的配制 ①石碳酸复红,称取碱性复红四克,溶解于95%酒精100mL内,取该溶液10mL与5%石碳酸水溶液90mL混匀而成。②美兰复染液,取美兰2克,溶解于95%乙醇100mL中,取该溶液30mL与0.01克KOH溶液70mL混合,用滤纸过滤备用。
3 加温方法比较
3.1 热染色法 在已固定好的涂片上加石硕酸复红液加温染色。
3.2 间接加温法 涂片火焰固定后,趁玻片冷却时,立即加石碳酸复红染液,不再加温。
3.3 冷染色法 在固定好的涂片上加丙酮5~6滴,放1~2分钟,倾去丙酮、水洗,然后加石碳酸复红染液,不加温。
上述三种其余脱色,复染步骤(略)均相同。
我们将同一病人痰液分别作三张涂片,按以下三种不同的加温方法分别进行染色对比试验,经40份标本涂片染色后,在油镜下观察,得出以下结果:
第一、二两种方法染色结果无区别,第三种方法同样能着染TB菌染成深红色,背景仍为蓝色,对比鲜明。
4 讨论
4.1 从表中看出,痰液厚涂片,其痰量应以0.1mL最佳,它即保持了痰膜的完好,又有利于脱色,且能提高痰菌检出的阳性率,如痰膜过厚,一方面降低痰膜的完好率,另一方面消耗过多的染液和脱色剂,不经济,且脱色时间也相应延长,费工。
4.2 从不同加温方式和不加温的情况来看,三种方法均能着色,但相比之下,第二种方法具有操作简便,省时,省能源效果满意的特点。
4.3 丙酮处理冷染法与经典的ziehl-reelsen加温染色具有同样的可靠性且可以免除加温染色所带来的一系列麻烦,特别是操作大量染片时,此法具有简易、快速、整洁和操作舒适等的优点,但需消耗一定量的丙酮,且染色时间比第二种方法长。
综上所述,以第二种方法涂片火焰固定后趁热染色,不再加温,操作简便,效果也好,适合现目前推广应用。
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